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1、本研究選擇了SPF18日雞胚及出殼后1、4、7、14、28、56、84、120日齡雞,分為兩組,免疫組接種新城疫弱毒Lasota活疫苗,對(duì)照組雞不做任何處理。兩組雞均在免疫后的第10天剖殺,采取胸腺、脾臟,制作冰凍切片,進(jìn)行HE染色和免疫組化染色;無菌采取胸腺、脾臟,分離淋巴細(xì)胞,進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(MTT法)。對(duì)不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后中樞免疫器官胸腺和外周免疫器官脾臟的組織發(fā)生過程、T淋巴細(xì)胞及其亞群的動(dòng)態(tài)變化和T淋
2、巴細(xì)胞增殖反應(yīng)及其IL-2誘生的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行測(cè)定。旨在全面系統(tǒng)的揭示不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾臟中T淋巴細(xì)胞發(fā)育及其免疫功能發(fā)生的變化規(guī)律。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn): 利用HE染色方法觀察不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾臟的組織結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn):SPF對(duì)照組雞胸腺7日齡時(shí)胸腺小葉皮質(zhì)和髓質(zhì)分界鮮明。隨著日齡的增加,胸腺小葉增多、增大,髓質(zhì)比例增大,胸腺小體增多,髓質(zhì)出現(xiàn)融合。94日齡時(shí)胸腺各小葉間髓質(zhì)部連接在一起,
3、形成較大的片狀結(jié)構(gòu),分布面積較大,同時(shí)髓質(zhì)中的胸腺小體數(shù)量和上皮細(xì)胞逐漸明顯增多。130日齡胸腺皮質(zhì)開始變薄,小葉結(jié)締組織的脂肪細(xì)胞侵入胸腺實(shí)質(zhì),總體說明胸腺開始趨于退化。與對(duì)照組比較,免疫組雞胸腺在不同日齡較同日齡對(duì)照組無明顯差異。SPF對(duì)照組雞脾臟7日齡時(shí),白髓和紅髓分界清楚,未見脾小體。14日齡時(shí)形成了脾小體。隨著日齡的增大,脾臟中動(dòng)脈周圍淋巴鞘數(shù)目增多、脾小體增多增大。130日齡時(shí),動(dòng)脈周圍淋巴鞘面積呈下降趨勢(shì)。與對(duì)照組比較,免
4、疫組各日齡動(dòng)脈周圍淋巴鞘和脾小體數(shù)目和面積顯著增多和增大,其他均與對(duì)照組無顯著差異。結(jié)果表明,SPF對(duì)照組雞隨著日齡的增長(zhǎng),胸腺和脾臟的發(fā)育逐漸完善,免疫能力不斷增強(qiáng)。不同日齡雞Lasota疫苗免疫后胸腺的組織發(fā)育不受影響,而脾臟組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,以增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。 利用免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)合計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)研究不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾臟中T淋巴細(xì)胞及其亞群的動(dòng)態(tài)變化發(fā)現(xiàn):SPF對(duì)照組雞隨著日齡的增加,
5、胸腺和脾臟中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞總體呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。與對(duì)照組比較,免疫組胸腺CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞均有上升趨勢(shì),但統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異不顯著。免疫組脾臟中CD3+和CD4+T細(xì)胞均不同程度地高于對(duì)照組,而CD8+T細(xì)胞均明顯降低(P<0.05)。結(jié)果表明,SPF對(duì)照組雞隨著日齡的增長(zhǎng),胸腺和脾臟中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞總體呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì),并呈現(xiàn)出一定的年齡相關(guān)性變化。不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后,對(duì)胸
6、腺中T細(xì)胞的數(shù)量影響不大,而對(duì)脾臟能夠引起T細(xì)胞及其亞群的變化,這樣的變化更有利于細(xì)胞的激活,抗體的產(chǎn)生和細(xì)胞因子的釋放。 利用MTT法研究不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾臟中T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)及IL-2誘生活性的動(dòng)態(tài)變化發(fā)現(xiàn):SPF對(duì)照組雞從14日齡時(shí),胸腺和脾臟中的T淋巴細(xì)胞開始具有增殖功能,并且此后隨著日齡的增加增殖功能逐漸增強(qiáng),直到56日齡時(shí)達(dá)到最大值,94日齡時(shí)下降并趨向于穩(wěn)定。與對(duì)照組比較,免疫組雞胸腺
7、和脾臟中T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和IL-2誘生活性均呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。結(jié)果表明,不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后均能夠提高機(jī)體的細(xì)胞免疫功能,且隨著年齡的增加而增強(qiáng),呈現(xiàn)一定的年齡相關(guān)性變化。 上述研究結(jié)果首次從組織水平、細(xì)胞水平和分子水平對(duì)不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后T淋巴細(xì)胞發(fā)育及其免疫功能發(fā)生進(jìn)行了研究,表明不同日齡雞免疫新城疫Lasota疫苗后對(duì)胸腺的組織結(jié)構(gòu)發(fā)生和T淋巴細(xì)胞發(fā)育沒有影響,而能夠促進(jìn)脾臟的組織發(fā)育,
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