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文檔簡(jiǎn)介
1、由于技術(shù)改革,在過(guò)去的三十年里中國(guó)的養(yǎng)禽業(yè)取得巨大的發(fā)展。這促使中國(guó)成為世界上最大的禽蛋和禽肉生產(chǎn)國(guó)。此外,養(yǎng)禽業(yè)也滿足國(guó)家的13.5億人民的營(yíng)養(yǎng)需求與優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的供給。中國(guó)家禽業(yè)主要依賴于飼養(yǎng)本地品種和進(jìn)口品種的肉用型和蛋用型雞。雞蛋的生物學(xué)價(jià)值全面,含有大量的維生素、礦物質(zhì)及質(zhì)美價(jià)廉的蛋白質(zhì)。由于國(guó)家經(jīng)濟(jì)的多重上漲,消費(fèi)者的購(gòu)買力增加,這顯示出對(duì)家禽產(chǎn)品的市場(chǎng)需求。FAO預(yù)測(cè)未來(lái)十年人均雞肉消費(fèi)量從11.2/kg/年增加到13.8/
2、kg/年。很明顯消費(fèi)者喜歡的地方品種雞,因其低產(chǎn)性能這將很難應(yīng)對(duì)家禽產(chǎn)品的供應(yīng)和需求。只能通過(guò)與高產(chǎn)的商品蛋雞進(jìn)行比較,進(jìn)而識(shí)別阻礙地方品種生產(chǎn)性能的生物因子,然后通過(guò)品種的選育來(lái)平衡地方品種雞的不足。家禽的生產(chǎn)性能主要是取決于卵泡發(fā)育,因此有必要深入研究卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)機(jī)理以及通過(guò)其調(diào)控來(lái)改進(jìn)品種。本文旨在比較傳統(tǒng)地方品種雞與商業(yè)蛋雞的差異,建立卵泡的體外培養(yǎng)體系,研究生長(zhǎng)因子對(duì)卵泡發(fā)育的調(diào)控作用,為進(jìn)一步調(diào)高地方品種蛋雞的產(chǎn)蛋性能提供
3、理論依據(jù)。
1.高產(chǎn)和低產(chǎn)品種蛋雞肝臟和卵巢發(fā)育的比較
為了比較高產(chǎn)和低產(chǎn)兩種不同品種蛋雞的產(chǎn)蛋性能的差異,在實(shí)驗(yàn)一中我們比較高產(chǎn)和低產(chǎn)蛋雞的卵巢中各級(jí)卵泡的發(fā)育情況。為此,本實(shí)驗(yàn)以不同產(chǎn)蛋性能蛋雞(振寧土雞和海蘭蛋雞)作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。振寧土雞是浙江省優(yōu)良的地方品種,采用多種生態(tài)環(huán)境的放養(yǎng)模式進(jìn)行飼養(yǎng)管理。首先我們比較這兩個(gè)品種蛋雞的肝臟、卵巢和輸卵管的指數(shù)。此外,比較這兩個(gè)品種蛋雞的肝臟、卵巢和輸卵管的組織形態(tài)學(xué)的差
4、異。最后,比較這兩個(gè)品種蛋雞的蛋品質(zhì)。結(jié)果表明,海蘭蛋雞的肝臟、卵巢和輸卵管指數(shù)顯著高于振寧土雞。此外,盡管兩個(gè)品種蛋雞的輸卵管大小相似,但海蘭蛋雞的輸卵管重量顯著高于振寧土雞。除此以外,海蘭蛋雞的卵巢重量和等級(jí)卵泡也比振寧土雞的大,而且組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)明顯的差異。而兩個(gè)品種蛋雞的蛋品質(zhì)方面也存在明顯的差異。與振寧土雞相比,海蘭蛋雞的蛋重和蛋白重較大,哈氏單位和蛋白的高度也比較高。因此,具有不同產(chǎn)蛋性能的振寧土雞和海蘭蛋雞在肝臟、卵巢
5、輸卵管指數(shù)及其形態(tài)方面都存在差異。
2.蛋雞原始卵泡的分離、培養(yǎng)和鑒定
蛋雞的高產(chǎn)性能主要還依賴于調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)原始卵泡進(jìn)入等級(jí)發(fā)育。卵泡體外培養(yǎng)體系的建立對(duì)于研究卵泡發(fā)育是一項(xiàng)非常有用的技術(shù)。因此,本實(shí)驗(yàn)我們采用酶分離法分離卵泡并采用不同的培養(yǎng)條件培養(yǎng)原始卵泡。本實(shí)驗(yàn)旨在分離足夠數(shù)量的原始卵泡,并確定適宜的培養(yǎng)條件。為此,我們以2周齡的小雞為研究對(duì)象,比較不同的酶如胰蛋白酶-EDTA、膠原酶Ⅱ和ⅠA以及機(jī)械分離法分離
6、雞原始卵泡。我們計(jì)數(shù)分離的卵泡數(shù)量,并采用中性紅染色檢測(cè)卵泡的活性。然后分離的卵泡采用不同的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)如海藻酸鹽凝膠、甲基纖維素、礦物油、浮動(dòng)和平面培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,由胰蛋白酶-EDTA分離的卵泡數(shù)量最多,其次為膠原酶Ⅱ,然后是膠原酶ⅠA和機(jī)械分離法。不同的酶和分離方法獲得的卵泡恢復(fù)率有顯著的差異。由機(jī)械分離法獲得的卵泡活性最高。此外,酶對(duì)卵泡的形態(tài)的影響也有差異?;蔚穆涯讣?xì)胞數(shù)在膠原酶Ⅱ和膠原酶ⅠA組較高。膠原酶ⅠA,裸卵母
7、細(xì)胞在胰蛋白酶-EDTA和膠原酶Ⅱ組較高。此外,我們的卵泡體外培養(yǎng)結(jié)果表明培養(yǎng)12 d后海藻酸鹽凝膠組具有最多的存活率。而且,形態(tài)學(xué)結(jié)果表明原始卵泡的平均直徑在50~53μm范圍,卵母細(xì)胞周圍的扁平顆粒細(xì)胞數(shù)平均大于12個(gè)。因此,目前我們成功的分離并培養(yǎng)了雞的原始卵泡,為更進(jìn)一步研究雞的原始卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育奠定了基礎(chǔ)。
3.LIF對(duì)卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的作用
本實(shí)驗(yàn)旨在研究不同的生長(zhǎng)因子對(duì)不同發(fā)育階段卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)作用。為此,
8、我們選擇白血病抑制抑制(LIF)和干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF)來(lái)研究他們對(duì)原始卵泡、初級(jí)卵泡和小黃卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)。我們采用卵巢體外培養(yǎng)模型來(lái)研究LIF和SCF對(duì)卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)。分離16日齡小雞的卵巢,將皮質(zhì)層剪切成1mm3的組織塊,建立卵巢體外培養(yǎng)體系,DMEM培養(yǎng)液中添加了10μg/mL胰島素、5μg/mL轉(zhuǎn)鐵蛋白和3×10-8 mol/L亞硒酸鈉(稱ITS培養(yǎng)液)。在該培養(yǎng)模型中,添加不同濃度的LIF和SCF來(lái)檢測(cè)他們對(duì)卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)作
9、用。采用BrdU摻入法和組織形態(tài)學(xué)法分析卵泡的發(fā)育。組織形態(tài)學(xué)和BrdU免疫熒光結(jié)果表明培養(yǎng)12d后,LIF和SCF顯著增加原始卵泡的生長(zhǎng)。而且,BrdU摻入結(jié)果表明卵泡培養(yǎng)24 h后初級(jí)卵泡和小黃卵泡發(fā)生增殖。LIF免疫組化結(jié)果表明LIF在卵巢的不同發(fā)育階段都有表達(dá)。因此,以上研究結(jié)果表明,LIF和SCF間接地參與了原始卵泡、初級(jí)卵泡和小黃卵泡的生長(zhǎng)和發(fā)育。
綜上所述,本研究比較了高產(chǎn)和低產(chǎn)兩種不同品種蛋雞的與產(chǎn)蛋性能相關(guān)的
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