一種不同于entosis的細胞胞內(nèi)死亡.pdf

1、目的與意義： 細胞進出運動(cell-in-cell)現(xiàn)象分為同種與異種兩大類型，我們擬通過比較兩大類細胞胞內(nèi)死亡來探討免疫細胞進入腫瘤細胞以及腫瘤細胞進入腫瘤細胞的形成機理和生物學(xué)意義，并可為研究免疫細胞與腫瘤細胞相互作用提供一個獨特的研究體系。 材料和方法： 1.采用吉姆薩染色、熒光標記、Realtime細胞實時追蹤、共聚焦掃描、電鏡超微結(jié)構(gòu)分析等方法對細胞形態(tài)進行觀察分析，并用不同的NK細胞與腫瘤細胞檢測了

2、細胞進入發(fā)生的范圍。 2.利用免疫熒光、流式、熒光底物等方法對細胞的特異性蛋白進行標記檢測，比較與吞噬運動、細胞凋亡、entosis現(xiàn)象的異同點。 3.利用siRNA技術(shù)、免疫熒光、藥物處理等方法，檢測參與細胞進出運動的關(guān)鍵蛋白及信號通路。 結(jié)果： 1.記錄到NK細胞進入腫瘤細胞的三種命運，以及NK細胞周圍的空泡結(jié)構(gòu)。NK細胞伸入腫瘤細胞現(xiàn)象發(fā)生廣泛。 2.NK細胞伸入腫瘤細胞與吞噬運動的識別信號

3、無直接關(guān)系，NK細胞在腫瘤細胞內(nèi)死亡后的caspase處于活化狀態(tài)，TUNEL(+)。 3.腫瘤細胞表面的E-cadherine及腫瘤細胞內(nèi)ezrin的表達會影響NK進入腫瘤細胞的比率，腫瘤細胞內(nèi)PKA途徑也會影響NK細胞的伸入率。 結(jié)論： NK細胞進入腫瘤細胞后大部分發(fā)生死亡，可能是腫瘤細胞反殺免疫細胞的一種模式。伸入運動發(fā)生廣泛，不存在MHC限制性，在干細胞中的伸入率很高，因此我們認為伸入運動具有普遍性和保