珙桐產(chǎn)黃酮內(nèi)生真菌的分離及鑒定.pdf

1、珙桐(DavidiainvolucrateBaill.)為我國(guó)特有的第三紀(jì)古熱帶植物的孑遺樹種，被列為我國(guó)一級(jí)保護(hù)植物。研究表明，珙桐葉提取物中含有槲皮素、山奈酚等黃酮類物質(zhì)。本研究從內(nèi)生真菌的角度出發(fā)，對(duì)珙桐中的內(nèi)生真菌進(jìn)行研究，結(jié)果如下： 1、采用組織分離法從珙桐組織中分離了126株內(nèi)生真菌。經(jīng)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，內(nèi)生真菌分離時(shí)，植物組織的表面消毒以75％酒精和0.1％升汞結(jié)合的方法較好；對(duì)琪桐莖部的升汞消毒時(shí)間以4～5min為宜，珙

2、桐葉子的升汞消毒時(shí)間應(yīng)控制在2min左右。珙桐中分離到的126株內(nèi)生真菌主要分布在樹葉和莖中。 2、以金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、大腸桿菌(Escherichiacold為測(cè)試菌種，對(duì)初選的126株珙桐內(nèi)生真菌進(jìn)行代謝產(chǎn)物活性篩選。其產(chǎn)物對(duì)三種細(xì)菌的抑菌率分別為65％、71％、25％，其中D37菌株對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用最強(qiáng)。 3、對(duì)具

3、抑菌活性的菌株D37進(jìn)行液體發(fā)酵。經(jīng)高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)分析證明菌株D37的次生代謝產(chǎn)物中含有槲皮素、山奈酚二種黃酮類物質(zhì)，每100g干菌絲可產(chǎn)黃酮31.9mg/100g。 4、根據(jù)菌株D37的形態(tài)學(xué)特征，結(jié)合核糖體內(nèi)部轉(zhuǎn)錄序列(internaltranscribedspacer，ITS)的測(cè)定結(jié)果，確定菌株D37為曲霉屬，煙曲霉種(Aspergillu