小分子PEI連接物的合成和體外基因轉(zhuǎn)染研究.pdf

1、本研究旨在合成可降解的聚乙烯亞胺（PEI）作為基因載體，從而實(shí)現(xiàn)高效低毒的非病毒基因轉(zhuǎn)染。通過利用1，4-丁二醇二氯甲酸酯作為聯(lián)接劑與小分子量PEI（ = 800）縮合，我們獲得了一種新的PEI衍生物（命名為PolyLinkB或簡稱為BLP）。在不同細(xì)胞系上將該聚合物載體用于兩個常用的報告基因---綠色熒光蛋白基因及熒光素酶基因的轉(zhuǎn)染時，我們獲得了高于大分子PEI（ = 25000）的基因轉(zhuǎn)染活性及相當(dāng)于小分子PEI （

2、 = 800）的低毒性。通過瓊脂糖凝膠電泳分析發(fā)現(xiàn)，該連接產(chǎn)物在與DNA的比例為1：1（w/w）的條件下可以將DNA完全復(fù)合，并且形成平均粒徑為65nm左右的復(fù)合物顆粒，載體與DNA比例（質(zhì)量比）的進(jìn)一步增大(5,7,10)對復(fù)合物粒徑?jīng)]有顯著影響，同時復(fù)合物的Zeta電勢也在載體材料與DNA的質(zhì)量比超過1以后穩(wěn)定在20mV左右。 產(chǎn)物的紅外光譜和核磁共振表征分別顯示了氨酯結(jié)構(gòu)的羰基伸縮振動（1698cm-1）及氨酯兩側(cè)