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1、腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(TNFrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)是TNF家族成員中的一員,TRAIL分子能夠特異性地誘導(dǎo)多種組織來(lái)源的腫瘤細(xì)胞凋亡,而不影響正常組織和細(xì)胞的功能,因而具有較好的臨床應(yīng)用前景。 應(yīng)用TRAIL進(jìn)行腫瘤的基因治療可以說(shuō)是一個(gè)很有潛力的途徑。因?yàn)轶w外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),攜帶TRAIL基因的腺病毒轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞不但可以誘導(dǎo)其自身的凋亡,還可以通過(guò)旁路效應(yīng)誘導(dǎo)未轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)
2、胞的死亡。 一些實(shí)驗(yàn)提示內(nèi)皮祖細(xì)胞(EndothelialProgenitorCell,EPC)在體內(nèi)能定向歸巢于腫瘤,參與腫瘤新生血管的建立。利用這一點(diǎn),將EPC偶聯(lián)抑制血管發(fā)生因子或其它抗腫瘤藥物或轉(zhuǎn)染抑癌基因可抑制腫瘤的生長(zhǎng),可能是治療腫瘤的有效方法?! ”疚姆忠韵聨讉€(gè)步驟進(jìn)行研究:1.LTRAIL對(duì)卵巢癌細(xì)胞的促凋亡作用。分析重組人TRAIL蛋白誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞3AO的凋亡作用。2.臍血EPC的分離、培養(yǎng)及鑒定。研究臍血中E
3、PC的分離方法、培養(yǎng)擴(kuò)增條件及鑒定其表面標(biāo)志。3.GFP-hTRAIL融合基因表達(dá)載體的構(gòu)建。構(gòu)建GFP-hTRAIL融合基因表達(dá)載體,測(cè)定其在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá)。4.TRAIL質(zhì)粒電穿孔及脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染EPC后分泌TRAIL蛋白的檢測(cè)及轉(zhuǎn)染效率的比較。研究電穿孔及脂質(zhì)體兩種轉(zhuǎn)染方法對(duì)EPC轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率。5.轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒后EPC培養(yǎng)上清對(duì)3A0卵巢癌細(xì)胞的體外殺傷作用。研究轉(zhuǎn)染TRAIL質(zhì)粒后EPC培養(yǎng)上清對(duì)3AO卵巢
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