糖尿病大鼠載脂蛋白A5水平和PPAR基因表達及羅格列酮的影響.pdf

1、載脂蛋白A5(ApoA5)是2001年在對人與小鼠的ApoA1/C3/A4基因簇序列進行比較時發(fā)現(xiàn)的一個新的載脂蛋白家族成員，是目前發(fā)現(xiàn)的第一個過度表達引起甘油三酯(TG)水平下降的載脂蛋白。動物和人類實驗研究表明，ApoA5不僅影響血脂代謝，而且與胰島素水平有一定關(guān)聯(lián)，說明ApoA5與糖、脂代謝密切相關(guān)。2型糖尿病常常合并高血糖、高胰島素血癥、高TG血癥等糖、脂代謝紊亂，其中心血管并發(fā)癥是糖尿病患者的主要并發(fā)癥和致死原因，糖尿病作為冠

2、心病的等危癥已為全球所共識。羅格列酮(RSG)是目前臨床上用于糖尿病和代謝綜合征治療的有效藥物。然而，目前人們對于ApoA5在血清中的水平、調(diào)控因素及其臨床意義知之甚少，因此研究血清中ApoA5水平，了解其在糖脂代謝中的作用及可能的調(diào)節(jié)機制有重要意義。 目的： 研究糖尿病大鼠血清ApoA5水平及RSG的影響，糖尿病大鼠肝臟過氧化物酶體增殖激活受體(PPAR)αmRNA和PPARγ mRNA的表達及RSG的影響；分析血清A

3、poA5水平與糖脂代謝指標及肝臟PPAR表達的相關(guān)性，探討ApoA5在糖脂代謝中的作用及調(diào)控的可能機制。 方法： 采用40只雄性SD大鼠進行動物實驗，建立對照組、高脂組、糖尿病組和糖尿病RSG干預(yù)組4組動物模型。實驗?zāi)Ｐ徒⑶安裳獧z測各組大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、穩(wěn)態(tài)模型評價的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-膽固

4、醇(LDL-C)、游離脂肪酸(FFA)。糖尿病大鼠模型的建立參照周氏等方法，給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)、腹腔注射鏈脲佐菌素。應(yīng)用RSG對糖尿病大鼠干預(yù)治療8周。全部動物實驗于第14周結(jié)束時集中處死動物，搜集血標本和肝臟組織標本。檢測各組大鼠的血FBG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA濃度。用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測各組大鼠血清ApoA5水平；并與血清FBG、FINS、HOMA-IR、TG、TC

5、、HDL-C、LDL-C、FFA水平進行相關(guān)分析。逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)測定各組大鼠肝臟組織PPARα mRNA和PPARγ mRNA的表達；并與血清ApoA5水平進行相關(guān)性分析。 結(jié)果： 1、與對照組比較，高脂組、糖尿病組和RSG干預(yù)組大鼠血清ApoA5明顯降低，以糖尿病組降低為甚(P均<0.05)；而RSG干預(yù)組大鼠較糖尿病組血清ApoA5水平有明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 2、

6、大鼠血清ApoA5水平與TG(r=-0.781，P=0.000)，TC(r=-0.643，P=0.000)，F(xiàn)BG(r=-0.758，P=0.000)，F(xiàn)INS(r=-0.578，P=0.001)，HOMA-IR(r=-0.798，P=0.000)均呈顯著負相關(guān)；而與HDL-C(r=0.469，P=0.010)呈顯著正相關(guān)；與LDL-C(r=-0.323，P=0.088)和FFA(r=-0.329，P=0.082)無明顯相關(guān)性。

7、 3、PPARα mRNA和PPARγmRNA在各組大鼠的肝臟均有表達(灰度值比值)。四組大鼠中，以糖尿病組PPARα mRNA表達為最低，PPARγmRNA表達為最高(P均<0.05)；與糖尿病組比較，RSG干預(yù)組PPARαmRNA的表達有升高(P<0.05)，PPARγ mRNA的表達有減低(P<0.05)。 4、大鼠血清ApoA5水平與肝組織PPARα mRNA表達呈顯著正相關(guān)(r=0.577，P=0.001)；而與肝組織

8、PPARγ mRNA表達呈顯著負相關(guān)(r=-0.593，P=0.001)。 結(jié)論： 1、糖尿病大鼠血清ApoA5水平明顯下降，羅格列酮可上調(diào)血清ApoA5水平；大鼠血清ApoA5水平與TG、TC、FBG、FINS、HOMA-IR水平呈顯著負相關(guān)，與HDL-C水平呈顯著正相關(guān)，提示ApoA5參與糖、脂代謝并受羅格列酮的影響。 2、PPARαmRNA和PPARγ mRNA在大鼠肝臟組織均有表達；以糖尿病組大鼠PPAR