新型藻藍(lán)蛋白-羧甲基殼聚糖納米微球的制備及其對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用研究.pdf

1、目的：制備新型負(fù)載藻藍(lán)蛋白（C-phycocyanin，C-PC）的羧甲基殼聚糖（Carboxymethyl chitosan，CMC）納米微球（nanoparticles，NPs），探討藻藍(lán)蛋白/羧甲基殼聚糖納米微球（C-PC/CMCNPs）對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及分子機(jī)制。
　　方法：以CMC和C-PC的質(zhì)量比、CMC濃度、CaCl2濃度為考察因素，利用正交分析方法，通過檢測(cè)C-PC/CMCNPs的粒徑和包封率，優(yōu)選C-PC

2、/CMCNPs的制備條件，并在最佳條件下制備 C-PC/CMCNPs。然后將 C-PC、CMC和C-PC/CMCNPs分別作用于HeLa細(xì)胞，CCK-8法檢測(cè)HeLa細(xì)胞的增殖，免疫組化法檢測(cè)JNK蛋白的表達(dá)情況，免疫熒光法檢測(cè)Bcl-2蛋白的表達(dá)，Western blotting法檢測(cè)Caspase-3蛋白表達(dá)的差異，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HeLa細(xì)胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：篩選出C-PC/CMCNPs的最佳制備條件為CMC與C-PC的

3、質(zhì)量比為1:2，CMC濃度為1 mg/ml，CaCl2濃度為1 mg/ml。最終所制備的C-PC/CMCNPs的平均粒徑為118.4±2.07 nm，并具有較高的包封率（63.2％）；其12 h的累積緩釋率超過60％。C-PC、CMC和C-PC/CMCNPs均能抑制HeLa細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)促凋亡基因 Caspase-3和JNK的表達(dá)，抑制抗凋亡基因 Bcl-2蛋白的表達(dá)，其中C-PC/CMCNPs的作用效果最為顯著。