拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑對CNE-2細(xì)胞株放射增敏的體外比較實驗研究.pdf

1、目的：應(yīng)用細(xì)胞克隆形成法，初步比較拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑拓?fù)涮婵?、伊立替康、羥喜樹堿對人鼻咽癌低分化細(xì)胞株CNE2的放射增敏作用。 方法：培養(yǎng)鼻咽癌低分化細(xì)胞株CNE2。將指數(shù)生長期的細(xì)胞按1×104個/孔接種到96孔板，用WST法進(jìn)行拓?fù)涮婵怠⒁亮⑻婵?、羥喜樹堿的細(xì)胞毒性檢測，得出IC50、IC10。將IC10作為放射增敏的工作濃度。待細(xì)胞生長至指數(shù)生長期，進(jìn)行細(xì)胞收集、重懸、計數(shù)，并按射線照射劑量梯度，在培養(yǎng)皿中加入不同細(xì)胞總數(shù)

2、的細(xì)胞懸液。實驗分為正常對照組、單純照射組、單純藥物組、藥物+照射組，其中藥物+照射組分為三個亞組：拓?fù)涮婵?照射組、伊立替康+照射組、羥喜樹堿+照射組。在照射前30分鐘分別加入工作濃度的拓?fù)涮婵怠⒁亮⑻婵?、羥喜樹堿，后按不同的照射劑量梯度照射。采用醫(yī)用直線加速器，照射條件為6 MV X線照射，劑量率為：418.41cGy/min，SSD為100cm，PDD為99.4％，照射野大小為25×25cm。照射后4小時，更換培養(yǎng)基，在37℃、0

3、.5％CO2恒溫孵育箱中培養(yǎng)14天，應(yīng)用計數(shù)克隆形成方法，計算細(xì)胞存活率，用單擊多靶數(shù)學(xué)模型，使用GraphPadPrism5.0軟件進(jìn)行曲線擬合作圖。通過計算N、D0、Dq、SERD0、SERDq、SERSF2，比較單純照射組和藥物+照射組之間，以及各個藥物+照射亞組之間的放射增敏作用的強(qiáng)弱。 結(jié)果：拓?fù)涮婵怠⒁亮⑻婵?、羥喜樹堿對CNE2細(xì)胞的IC50分別為0.28ug/ml、1.43ug/ml、18.78ug/ml；IC10

4、分別為0.08ug/ml、0.56ug/ml、0.68ug/ml。CNE2細(xì)胞的克隆形成率為68％。單純照射組的N值為3.728，D0值為1．187Gy，Dq值為0.678 Gy；拓?fù)涮婵?照射組的N值為5.219，D0值為0.560 Gy，Dq值為0.402Gy，SERD0、SERDq、SERSF2分別為2.120、1.687、5.255；伊立替康+照射組的N值為2.906，D0值0.911Gy，Dq值為0.422Gy，SERD0、S