DNMT1基因shRNA干擾重組體介導(dǎo)的人乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用的研究.pdf

1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文DNMT1基因shRNA干擾重組體介導(dǎo)的人乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用的研究姓名：魏欽俊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：曹新20080428南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文DMMrZ基因shRNA干擾重組體介導(dǎo)的人乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用的研究中文摘要表型遺傳修飾(epigenesis)是誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生、發(fā)展一個(gè)重要的分子遺傳學(xué)途徑，其中DNA甲基化是最常見的哺乳細(xì)胞表型遺傳修飾方式。DNA的異常甲基化主

2、要iS_過(guò)DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNAmethyltransferase，DNMT)來(lái)實(shí)現(xiàn)。DNMT按照酶功能的不同可分為從頭產(chǎn)生DNA甲基化的酶(DNMT3a和DNMT3b)和維持烈妊甲基化的酶(DNMTl)，其中D】心假1在基因組DNA甲基化維護(hù)中有著舉足輕重的作用。目前認(rèn)為正確維持DNA甲基化狀態(tài)是正常生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中所必需的，許多腫瘤的發(fā)生與甲基化狀態(tài)的異常密切相關(guān)。本研究擬通過(guò)鼢愴干擾(RNAinterference，RNAi)技

3、術(shù)I&mRNA水平來(lái)抑制DNMTl基因的表達(dá)，使乳腺癌細(xì)胞中研心仃1活性下調(diào)或抑制，解除乳腺癌發(fā)生相關(guān)基因啟動(dòng)子區(qū)的高度甲基化，從而抑制乳腺癌細(xì)胞的異常增殖或逆轉(zhuǎn)乳腺細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)變，為探索乳腺癌的臨床分子治療奠定重要的理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的：利用RNAi技術(shù)，構(gòu)建靶向DNMTl基因的短發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA，shRNA)重組質(zhì)粒，將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到人乳腺癌MCF7細(xì)胞中，觀察其在乳腺癌MCF7細(xì)胞中抑制DNMTI基因的表