MGP、BMP2在尿毒癥患者橈動(dòng)脈鈣化中的表達(dá)及鈣化的相關(guān)因素分析.pdf

1、心血管事件是終末期腎病(end-stage renal disease，ESRD)患者的主要并發(fā)癥之一，也是其主要的死亡原因。其中血管、心臟瓣膜鈣化是ESRD致心血管疾病的主要原因。因此，深入研究血管鈣化的病因及發(fā)病機(jī)制將有助于防治慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)患者的心血管并發(fā)癥，降低ESRD患者的死亡率，延長生存時(shí)間。ESRD患者動(dòng)脈鈣化主要有內(nèi)膜鈣化、中膜鈣化兩種形式。內(nèi)膜鈣化主要出現(xiàn)在大動(dòng)脈，中

2、小型動(dòng)脈則以中膜鈣化為主。目前，有許多檢查方法可以用來檢測(cè)血管鈣化。組織學(xué)檢查是判斷血管鈣化的金標(biāo)準(zhǔn)，組織學(xué)標(biāo)本的獲取方法主要為尸檢或者病人手術(shù)中取得。近期的研究表明，血管鈣化是一種類似于骨和軟骨形成的主動(dòng)的調(diào)節(jié)過程，是血管平滑肌細(xì)胞(vascular smoothmuscle cells，VSMC)發(fā)生骨樣變化的主動(dòng)調(diào)節(jié)過程，許多因素參與了這一過程的調(diào)節(jié)。在CKD患者當(dāng)中，越來越多臨床資料顯示其血管鈣化與鈣磷代謝異常有關(guān)，其中高磷血癥

3、、鈣磷乘積升高及甲狀旁腺素的作用越來越受到重視。根據(jù)眾多相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究，我們推測(cè)，慢性腎臟病血管鈣化的發(fā)生可能是高磷誘導(dǎo)VSMC轉(zhuǎn)分化為成骨樣細(xì)胞為起點(diǎn)，經(jīng)一些相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)，最終導(dǎo)致鈣化的發(fā)生。基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(Matrix Gla Proten,MGP)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BoneMorphogenetic protein2，BMP2)就是其中兩種蛋白。MGP是血管內(nèi)鈣化的重要調(diào)節(jié)因子，是礦鹽沉積的重要抑制物，通過對(duì)骨形態(tài)蛋白(

4、BMPs)發(fā)揮作用，鈣、磷及其調(diào)節(jié)物甲狀旁腺激素(PTH)均能影響或調(diào)節(jié)MGP的表達(dá)。BMP2是一種高效的骨誘導(dǎo)因子，可以通過多種機(jī)制促進(jìn)血管鈣化，其中就包括可能與MGP組成復(fù)合物從而促進(jìn)血管鈣化。因此，本實(shí)驗(yàn)旨在探討MGP、BMP2在尿毒癥患者橈動(dòng)脈的表達(dá)與血管鈣化關(guān)系以及研究其他因素對(duì)血管鈣化的影響。
　　 研究目的：
　　 MGP、BMP2在尿毒癥患者橈動(dòng)脈鈣化中的表達(dá)情況以及各種可能影響尿毒癥患者發(fā)生鈣化因素的相

5、關(guān)分析。
　　 方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)對(duì)尿毒癥患者橈動(dòng)脈進(jìn)行研究，標(biāo)本通過動(dòng)靜脈內(nèi)瘺手術(shù)獲取，共取標(biāo)本33例，應(yīng)用HE染色觀察血管的內(nèi)膜、中膜、外膜三層基本結(jié)構(gòu)，應(yīng)用茜素紅染色觀察血管鈣化情況及嚴(yán)重程度，記錄患者的臨床及生化指標(biāo)。比較鈣化與無鈣化、輕度鈣化與重度鈣化組的血鈣、血磷等指標(biāo)，并對(duì)糖尿病等定性資料與血管鈣化的比較。通過免疫組化的方法，明確MGP、BMP2在鈣化的血管有表達(dá)，且表達(dá)在動(dòng)脈中膜，免疫組化結(jié)果用Imag

6、e Pro Plus6.0圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，比較目的蛋白的累積光密度。
　　 結(jié)果：
　　 HE染色光鏡下，血管三層結(jié)構(gòu)清晰，部分血管中膜明顯增厚，內(nèi)彈力膜完整。茜素紅染色，鏡下可觀察到鈣化區(qū)域可見橘紅色的鈣沉積，鈣化發(fā)生率36.3％。鈣化組的血磷、鈣磷乘積、血甲狀旁腺素水平高于無鈣化組，兩組血鈣水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，鈣化組血低密度脂蛋白膽固醇水平低于無鈣化組。免疫組化檢測(cè)MGP、BMP2，明確MGP、BMP2在

7、鈣化血管表達(dá)，且表達(dá)在動(dòng)脈中膜與發(fā)生鈣化位置一致，無鈣化血管未見MGP、BMP2表達(dá)。重度鈣化組MGP、BMP2蛋白表達(dá)量高于輕度鈣化組。
　　 結(jié)論：
　　 1.尿毒癥患者的橈動(dòng)脈鈣化主要發(fā)生在中膜，血管鈣化標(biāo)本中有BMP2、MGP的表達(dá)，表達(dá)的位置與鈣化位置一致，無鈣化血管標(biāo)本中未檢測(cè)到MGP、BMP2的表達(dá)。BMP2與MGP兩種蛋白對(duì)血管鈣化有影響，而且兩種蛋白的表達(dá)量與鈣化的嚴(yán)重程度相關(guān)，重度鈣化組中兩種蛋白的表