代謝綜合征患者內(nèi)脂素水平及與Tribble 3基因多態(tài)性的相關(guān)研究.pdf

1、研究背景：
　　 代謝綜合征(MS)是以中心性肥胖、胰島素抵抗、糖尿病或糖調(diào)節(jié)受損、高血壓、血脂異常為共同病理生理基礎(chǔ)，以多種代謝性疾病合并出現(xiàn)為臨床特點(diǎn)的一組臨床癥候群。它的每一種組分都是心血管病的危險(xiǎn)因素，各種組分的協(xié)同致病作用更強(qiáng)。流行病學(xué)資料顯示，MS與冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，MS患者心血管疾病的發(fā)病率和死亡率明顯升高，因此，從發(fā)病機(jī)制層面深入研究MS與心血管疾病之間的關(guān)系，對(duì)制定和建立有效的防治措施，降低MS患者

2、心血管疾病的發(fā)病和死亡具有重要的戰(zhàn)略意義。
　　 MS發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，近年來(lái)，炎癥和遺傳因素在MS發(fā)病機(jī)制中的地位越來(lái)越引起人們的重視。目前認(rèn)為脂肪組織分泌的多種脂肪因子同時(shí)也是炎癥介質(zhì)。內(nèi)脂素是一種新型的有類(lèi)胰島素樣作用的脂肪因子，最近在人動(dòng)脈粥樣瘢塊組織中發(fā)現(xiàn)了內(nèi)脂素，研究表明它在炎癥發(fā)生中具有重要作用。迄今為止，在MS和頸動(dòng)脈粥樣硬化患者中內(nèi)脂素的血漿水平的變化及與患者某些臨床指標(biāo)及IMT相關(guān)的研究罕見(jiàn)報(bào)道并且尚有爭(zhēng)議。

3、
　　 MS除了受環(huán)境因素的影響，遺傳因素在其發(fā)病中也起著重要作用。研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗作為MS的重要病因之一也受遺傳因素的影響。人類(lèi)TRB3基因作為tribbles的同源物，被證實(shí)為胰島素抵抗和糖尿病的候選基因，近年來(lái)成為研究的熱點(diǎn)。有研究表明TRB3基因Q84R(+251A/G)多態(tài)性與胰島素抵抗和相關(guān)的心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)有著密切的聯(lián)系。但TRB3與內(nèi)脂素的聯(lián)系國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。MS患者的血清內(nèi)脂素水平如何變化?合并動(dòng)脈粥樣硬

4、化者其水平是否有進(jìn)一步的改變?內(nèi)脂素與MS各組分及IMT有何聯(lián)系?TRB3基因+251A/G多態(tài)性與內(nèi)脂素在MS中有無(wú)關(guān)系?鑒于以上問(wèn)題，構(gòu)成本研究的設(shè)計(jì)思路和研究目的。
　　 研究目的：
　　 (1)檢測(cè)MS患者血清內(nèi)脂素水平，探討其與MS各組分的關(guān)系；
　　 (2)檢測(cè)MS患者頸動(dòng)脈結(jié)構(gòu)與功能改變，探討內(nèi)脂素與頸動(dòng)脈IMT、斑塊及血管內(nèi)徑的關(guān)系；
　　 (3)檢測(cè)TRB3基因+251A/G的基因分型，

5、探討TRB3基因+251A/G多態(tài)性與內(nèi)脂素的關(guān)系。
　　 研究對(duì)象與方法：
　　 選擇參與者253例進(jìn)行病例一對(duì)照研究：其中MS組139例(平均年齡54±8歲，男性61例，女性78例)，正常對(duì)照組114例(平均年齡54±8歲，男性44例，女性70例，)，兩組間性別和年齡均相匹配。MS組按有無(wú)頸動(dòng)脈粥樣斑塊進(jìn)一步分為兩組進(jìn)行分析。對(duì)所有參與者進(jìn)行體格檢查，測(cè)量身高、體重、腰圍、臀圍和血壓等，并詢(xún)問(wèn)既往史、用藥史、家族史等

6、。所有參與者均經(jīng)隔夜禁食12～14小時(shí)，次日清晨抽取空腹肘靜脈血，測(cè)定空腹血糖(FBG)、胰島素、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)、尿酸(UA)；內(nèi)脂素的測(cè)量采用EIA法；采用酚/氯仿法提取全血DNA，-80℃保存?zhèn)溆?。采用GE vivid7彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率為5～10MHz。應(yīng)用高分辯率外周血管超聲技術(shù)，檢測(cè)MS患者頸動(dòng)脈結(jié)構(gòu)和功能改變；采用PCR-限制

7、性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)法分析TRB3基因型和等位基因頻率，分析內(nèi)脂素與MS及其各組分及TRB3基因多態(tài)性的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 (1)對(duì)照組和MS組臨床與生化特征比較：兩組年齡和性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與對(duì)照組相比較，MS組BMI，腰臀比，收縮壓，舒張壓，TG，TC，LDL-c，F(xiàn)BG，胰島素，HOMA，HbAlc，UA顯著升高；HDL-c顯著減低(P＜0.001)。
　　 (

8、2)MS患者血清內(nèi)脂素、IMT和頸動(dòng)脈內(nèi)徑的變化：與對(duì)照組相比較，MS組內(nèi)脂素，Max-IMT，Mean IMT，頸動(dòng)脈內(nèi)徑顯著升高(P＜0.001)。
　　 (3)有頸動(dòng)脈斑塊的MS組和無(wú)頸動(dòng)脈斑塊的MS組及對(duì)照組的臨床與生化特征比較：與對(duì)照組相比較，有頸動(dòng)脈斑塊的MS組和無(wú)頸動(dòng)脈斑塊的MS組BMI，腰臀比，收縮壓，舒張壓，TG，TC，LDL-c，F(xiàn)BG，胰島素，HOMA，HbAlc，UA均顯著升高；HDL-c均顯著減低。(P

9、＜0.001)
　　 (4)有頸動(dòng)脈斑塊的MS組患者血清內(nèi)脂素、IMT和頸動(dòng)脈內(nèi)徑的變化：與無(wú)頸動(dòng)脈斑塊的MS組相比較，有頸動(dòng)脈斑塊的MS組內(nèi)脂素，Max-IMT(P＜0.001)，MeanIMT(P＜0.01)顯著升高，頸動(dòng)脈內(nèi)徑升高，但無(wú)達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異標(biāo)準(zhǔn)。
　　 (5)內(nèi)脂素與各指標(biāo)間的Pearson線性相關(guān)、及多因素線性逐步回歸分析結(jié)果：內(nèi)脂素水平與TC(R=0.192，P=0.015)，LDL-c(R=0.21

10、9，P=0.007)和HOMA(R=0.163，P=0.010)呈線性相關(guān)；多因素線性逐步回歸分析結(jié)果顯示，內(nèi)脂素水平與LDL-c(R=0.219，P=0.013)獨(dú)立相關(guān)。
　　 (6)max-IMT與各指標(biāo)間的Pearson線性相關(guān)、及多因素線性逐步回歸分析結(jié)果：max-IMT水平與年齡(R=0.215，P=0.012)，舒張壓(R=-0.162，P=0.044)和內(nèi)脂素水平(R=0.282，P=0.001)呈線性相關(guān)；多因

11、素線性逐步回歸分析結(jié)果顯示，max-IMT水平與年齡(R=0.230，P=0.012)和內(nèi)脂素水平(R=0.293，P=0.001)獨(dú)立相關(guān)。
　　 (7)用內(nèi)脂素水平來(lái)預(yù)測(cè)合并頸動(dòng)脈粥樣硬化的MS的ROC曲線：Log內(nèi)脂素＞1.08ng/ml對(duì)于檢測(cè)具有頸動(dòng)脈斑塊的MS患者的敏感性是70％，特異性是67％。
　　 (8)TRBs3的+251A/G基因分型：PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度為593bp，GG基因型含有MspI酶切位點(diǎn)，酶切

12、后產(chǎn)生297bp和296bp兩個(gè)片段，由于297bp和296bp兩個(gè)片段分子量大小接近，在凝膠電泳成像后融合為一條帶，QQ基因型酶切位點(diǎn)消失，酶切后仍為593bp，QR基因型：593bp和297bp，RR基因型297bp。
　　 (9)TRIB3的基因多態(tài)性與內(nèi)脂素水平在MS中的比較：對(duì)照組間三種基因型的內(nèi)脂素水平無(wú)顯著性差異。MS組RR84型的內(nèi)脂素水平明顯高于QQ84型(P＜0.01)和QR84型(P＜0.05)。(10)M

13、S不同TRIB3+251A/G基因型與內(nèi)脂素水平之間的相關(guān)分析：MS的QQ基因型與內(nèi)脂素水平無(wú)顯著相關(guān)(P=0.227)；MS的RR基因型與內(nèi)脂素水平顯著相關(guān)(P=0.009)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)MS患者的血清內(nèi)脂素水平顯著升高；合并頸動(dòng)脈粥樣斑塊患者的內(nèi)脂素升高尤為明顯，提示內(nèi)脂素不僅參與了MS的發(fā)病，而且參與了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，有可能是MS和動(dòng)脈粥樣硬化之間的橋梁。
　　 (2)MS患者的內(nèi)

14、脂素水平與LDL獨(dú)立相關(guān)；內(nèi)脂素水平是頸動(dòng)脈max-IMT的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示著內(nèi)脂素和膽固醇代謝之間有密切的關(guān)系，有可能部分通過(guò)調(diào)節(jié)血脂代謝參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。
　　 (3)MS患者TRIB3+251A/G構(gòu)建的3種基因型中，RR84型的內(nèi)脂素水平顯著高于QQ84型和QR84型，提示TRB3存在基因多態(tài)性有可能對(duì)內(nèi)脂素具有調(diào)控作用。
　　 (4)MS患者的RR84基因型與內(nèi)脂素水平顯著相關(guān)，提示MS患者TRI