粘附分子CD146在系統(tǒng)性血管炎臨床和發(fā)病機制中意義的研究.pdf

1、目的:研究CD146在系統(tǒng)性血管炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的血漿、外周血白細胞、腎臟及血管壁的表達情況，觀察其在臨床活動期和緩解期的動態(tài)變化，并分析其與臨床炎癥指標的相關(guān)性，探討其在系統(tǒng)性血管炎發(fā)病機制中的可能作用。 方法:1.夾心ELISA方法檢測74例系統(tǒng)性血管炎[白塞病(BD)9例，大動脈炎(TA)11例，結(jié)節(jié)性多動脈炎(PAN)8例，韋格納肉芽腫(WG)24例，顯微鏡下多血管炎(MPA)18例，變應(yīng)性肉芽腫性血管(

2、CSS)炎6例]和17例SLE患者可溶性CD146(sCD146)和TNF-α水平，分析其與臨床炎癥指標和TNF-α的相關(guān)性。其中23例患者分別在活動期和治療好轉(zhuǎn)后分別檢測以觀察sCD146的動態(tài)變化。34例性別和年齡匹配的健康體檢者作為正常對照。 2.采用流式細胞術(shù)檢測42例系統(tǒng)性血管炎(BD4例，TA9例，PAN3例，WG11例，MPA13例，CSS2例)和15例SLE患者外周血白細胞CD146的表達。其中23例患者在活動期

3、時及治療好轉(zhuǎn)后分別進行檢測。將檢測結(jié)果與臨床資料進行相關(guān)性分析并觀察其動態(tài)變化。70人次同時收集了血漿進行sCD146的檢測。20例正常人抗凝血來源于健康體檢者。 免疫印跡方法檢測白細胞CD146蛋白的表達，RT-PCR檢測CD146mRNA的表達。培養(yǎng)內(nèi)皮細胞株VEC.304，作為蛋白和RT-PCR檢測時的陽性對照。3.HE和免疫組化染色分析11例AASV、13例LN、2例過敏性紫癜腎病和1例IgA腎病腎活檢標本冰凍切片CD1

4、46及CD31的表達異同。其中23例同時采集了血樣進行sCD146和外周血白細胞CD146的檢測。10例正常腎組織和10例腎癌組織作為血管的對照。另取類風濕關(guān)節(jié)炎滑膜標本5例和骨性關(guān)節(jié)炎滑膜標本3例。 結(jié)果:1.MPA患者組血漿中，sCD146的表達較正常人明顯升高(p＜0.01)，其水平與年齡和血肌酐相關(guān)，與炎癥指標和疾病活動指數(shù)以及TNF-α無關(guān)；其他各組與正常人相比無差異，但TA組的水平最低?；顒悠诩熬徑馄趕CD146的水

5、平分別為334.7±123.3ng/ml和412.9±146.1ng/ml，二者之間差異有顯著性(p=0.003)。 2.首次研究發(fā)現(xiàn)AASV和SLE組活動期外周血各類白細胞尤其是中性粒細胞CD146的表達明顯升高，但與炎癥指標和疾病活動指數(shù)無關(guān)，大劑量激素和免疫抑制劑治療能使CD146的表達明顯下降。少數(shù)其他結(jié)締組織病(CTD)患者也有陽性發(fā)現(xiàn)。目前國際上尚未見報道。 3.AASV組均為新月體型腎炎Ⅲ型，SLE患者中L

6、N-Ⅲ(A)3例，合并V1例；LN-ⅣG(A)型4例，LN-ⅣS(A)型3例，LN-Ⅱ型3例。腎臟和血管CD146的染色主要位于大、中血管和部分小血管的內(nèi)皮細胞及平滑肌細胞，但與CD31的表達強度和部位不同。腎小球內(nèi)皮細胞和腎小管及炎癥細胞CD146的染色基本為陰性，與血漿sCD146的水平及外周血白細胞的表達不一致。 結(jié)論:1.MPA患者sCD146的水平明顯升高，與年齡和血肌酐相關(guān)，也許反映了廣泛而嚴重的微、小血管內(nèi)皮損傷，

7、為MPA的臨床診斷提供了一個新的標志分子；其他各組與正常人相比無差異，但TA組水平最低，提示與MPA的內(nèi)皮損傷不同。 2.CD146在系統(tǒng)性血管炎尤其是AASV和SLE活動期外周血各類白細胞中存在激活現(xiàn)象，隨激素和免疫抑制劑治療病情好轉(zhuǎn)而轉(zhuǎn)陰，提示其在發(fā)病機制中可能起了重要的作用，并為治療提供了新的靶向。 3.外周血白細胞CD146的表達從活動期到好轉(zhuǎn)期呈下降趨勢，而sCD146呈上升趨勢，提示二者其在發(fā)病機制中可能相互