雞肉中氟喹諾酮類殘留MSPD-HPCE檢測方法研究.pdf

1、氟喹諾酮類藥物(FQs)是一類人工合成的抗菌藥,已被世界各國廣泛用于畜禽和水生動物疾病的防治。由于藥物的不合理使用,會造成動物可食性組織中殘留,除了本身具有毒副作用外,還會產(chǎn)生耐藥性,嚴(yán)重損害人體健康,因此建立快速、高效、靈敏的氟喹諾酮類藥物多殘留檢測技術(shù)具有重要意義。本研究建立了同時檢測雞肉中洛美沙星、氧氟沙星、恩諾沙星、培氟沙星多殘留的基質(zhì)固相分散萃取法-高效毛細管電泳(HPCE)法及液相-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)驗證方法,結(jié)果如下：

2、 1.高效毛細管電泳檢測FQs標(biāo)準(zhǔn)方法的建立實驗通過正交試驗對電泳緩沖液的離子濃度、緩沖液pH值、分離電壓和分離溫度等電泳條件進行了考察,建立了同時分離檢測洛美沙星、氧氟沙星、恩諾沙星和培氟沙星等4種FQs的HPCE法。電泳緩沖溶液：35 mmol/L硼砂緩沖液(pH 8.8);電壓：22kV;溫度：25℃：進樣壓力：0.8psi;進樣時間：10s;內(nèi)徑75μm×60cm未涂層熔融石英毛細管柱,上述4種藥物在7分鐘內(nèi)達到基線分離

3、。4種藥物濃度在0.5～20μg/g時與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。線性方程和相關(guān)系數(shù)為洛美沙星:C=2014.1S-104.47(R=0.9993)、氧氟沙星:C=3016S+61.316(R=0.9994)、恩諾沙星:C=1319.1S-122.69(R=0.9990)、培氟沙星:C=2696.1S-524.52(R=0.9996)。 2.雞肉中FQs樣品前處理方法的建立建立了3種樣品前處理方法：液-液萃取、固相萃取和基質(zhì)固相

4、分散萃取法,并對這3種方法進行比較,優(yōu)化后的樣品前處理方法為基質(zhì)固相分散萃取法。液-液萃取法：氟喹諾酮類藥物不同的組織樣品處理中多采用有機溶劑和磷酸鹽提取目標(biāo)化合物。本實驗考察了磷酸鹽緩沖液、乙腈、NaOH/乙腈和醋酸/乙腈對雞肉樣品中4種藥物的提取效果,結(jié)果表明,乙腈具有較強的蛋白沉淀效果,4種藥物的回收率為79.2％～107.07％,能夠滿足檢測要求。 3.雞肉中FQs多殘留的MSPD-HPCE檢測方法的建立利用優(yōu)化后的MS

5、PD-HPCE對實際樣品進行檢測,測得雞肉樣品中殘留濃度洛美沙星為1.219μg/g、氧氟沙星為1.045μg/g、恩諾沙星為0.961μg/g、培氟沙星為3.401μg/g。四種藥物的最低檢測限范圍為51μg/kg～100μg/kg。 4.LC-MS對MSPD-HPCE方法的驗證液相色譜條件：色譜柱(2.1mmI.D×150mm),流動相：0.1％甲酸溶液-乙腈,梯度洗脫,在0至7.0min內(nèi)乙腈體積分數(shù)從20％線性增加到70

6、％并保持至10min,在10.1min時乙腈體積分數(shù)改至20％并平衡10mim,流速0.2 mL/min,柱溫35℃,進樣量2μL。質(zhì)譜條件：離子化模式:ESI(+);鞘氣；氮氣,流速：0.75 L/min;輔助氣：氮氣,流速：0.15 L/min;離子源噴射電壓：4.5kV;毛細管溫度：180℃；毛細管電壓：13 kV;碰撞氣：氮氣；多級全掃描質(zhì)譜。獲得了各化合物的二級質(zhì)譜信息,發(fā)現(xiàn)氟喹諾酮類化合物在正離子檢測方式下可生成脫CO2、脫