MISPe-UPLC-MS-MS檢測(cè)雞肉中喹諾酮類藥物多殘留方法的研究.pdf

1、喹諾酮類藥物(Quinolones，QNs)具有抗菌譜廣、殺菌能力強(qiáng)、不良反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，在獸醫(yī)臨床上被廣泛用于動(dòng)物疾病的預(yù)防與治療。但隨著藥物使用量的增加，不合理使用現(xiàn)象也越來(lái)越嚴(yán)重，導(dǎo)致藥物在動(dòng)物體內(nèi)蓄積，進(jìn)而危害人類健康。因此，必須對(duì)動(dòng)物源性食品中此類藥物殘留進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)控。本研究建立了分子印跡固相萃取(MISPE)-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)檢測(cè)雞肉中23種喹諾酮類藥物多殘留的分析方法。
　　1.對(duì)同時(shí)

2、測(cè)定23種喹諾酮類藥物的UPLC-MS/MS分析條件進(jìn)行了優(yōu)化。對(duì)質(zhì)譜電離方式、定量離子、定性離子、錐孔電壓、碰撞能量、母離子、子離子等質(zhì)譜條件和流動(dòng)相組分與比例、梯度洗脫條件等色譜條件分別進(jìn)行了優(yōu)化。確定以0.1％(v/v)甲酸水-乙腈為流動(dòng)相，采用BEH C18色譜柱分離，梯度洗脫，采用電噴霧正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，外標(biāo)法定量。
　　2.對(duì)MISPE柱凈化23種喹諾酮類藥物的上樣液體積、淋洗、洗脫溶液的選擇及洗脫液的體積進(jìn)行優(yōu)化

3、，最后確定上樣液的體積為4mL，水、乙腈、2％(v/v)乙酸乙腈、0.1％(v/v)氨水各2mL為淋洗條件，5％(v/v)氨化甲醇3mL為洗脫條件。將雞肉樣品經(jīng)均質(zhì)處理后，采用磷酸鹽緩沖液提取，提取液經(jīng)MISPE柱上樣，依次用水、乙腈、2％(v/v)乙酸乙腈、0.1％(v/v)氨水淋洗，5％(v/v)氨化甲醇洗脫，氮?dú)獯蹈桑?.1％(v/v)甲酸水-乙腈(9∶1，v/v)復(fù)溶。考察了MISPE柱對(duì)23種喹諾酮類藥物的特異性吸附特性;MI

4、SPE柱最大柱容量范圍為470.6～898.3μg/L;考察了MISPE柱重復(fù)使用性，MISPE柱至少可以重復(fù)使用11次，回收率均達(dá)到75％以上，各藥物的變異系數(shù)在1.5％～14.9％之間。
　　3.系統(tǒng)評(píng)價(jià)了同時(shí)測(cè)定雞肉中23種喹諾酮類藥物的MISPE-UPLC-MS/MS方法的線性關(guān)系、檢出限、定量限、準(zhǔn)確度、精密度、基質(zhì)效應(yīng)、靈敏度等的考核指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)得出，各藥物在添加濃度在0.25～200μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)

5、(r)均大于0.99;檢出限(LOD)和定量限(LOQ)，分別為0.08μg/kg和0.25μg/kg;在0.25、2.5、5μg/L三個(gè)加標(biāo)濃度下，各藥物平均回收率為88.6％～103.3％，批間、批內(nèi)RSD分別為0.7％～10.5％和0.6％～13.2％:基質(zhì)對(duì)于各藥物分析結(jié)果不影響;本方法靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、快速。
　　4.利用優(yōu)化后的MISPE-UPLC-MS/MS分析方法對(duì)山東省某屠宰場(chǎng)采集的80份雞肉樣品進(jìn)行檢測(cè)，本方