不同配比下小腸粘膜下層（SIS）復(fù)合雙相磷酸鈣修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：骨缺損一直以來是臨床上常見的問題之一。有效的治療方法是修復(fù)骨缺損，以恢復(fù)骨的功能和矯正骨的畸形。由于自體骨和異體骨移植具有供骨來源有限、手術(shù)增加患者的痛苦、異體骨的免疫排斥及傳染病和腫瘤生成可能的缺點(diǎn)，因此用生物活性材料替代來修復(fù)骨缺損成為研究的熱點(diǎn)。隨著材料學(xué)及其他相關(guān)技術(shù)的發(fā)展，復(fù)合膠原的磷酸鈣人工骨已經(jīng)廣泛用于實(shí)驗(yàn)及臨床的研究，但還停留在使用提取自皮膚或腱組織的普通膠原的范圍。小腸粘膜下層(SIS)作為一種細(xì)胞外膠原基質(zhì)

2、，具有良好的生物相容性與降解性，其除了含有多種膠原成分外，還含有成纖維細(xì)胞生成因子(FGF--2)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF—p)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)等多種生物活性因子，因而用于血管，膀胱，皮膚，骨等多種細(xì)胞的組織工程的研究。然而，對于使用小腸粘膜下層(SIS)這種富含生物活性因子的膠原與磷酸鈣材料復(fù)合修復(fù)骨缺損的研究鮮有報道。 研究目的：本研究擬利用豬小腸粘膜下層(SIS)膠原組織特有的粘附性和雙相磷酸鈣(HA-TCP)

3、以不同的比例制成復(fù)合材料，通過觀察其在兔股骨髁缺損模型中的成骨作用，來初步探討不同比例的豬小腸粘膜下層(SIS)和雙相磷酸鈣(HA-TCP)復(fù)合材料對于骨缺損的修復(fù)的效果。 研究方法：1．取健康成年豬的新鮮近端空腸，通過機(jī)械方法刮除制得SIS，脫細(xì)胞凍干處理。 2．參考文獻(xiàn)膠原復(fù)合材料的比例，分別按照SIS和HA-TCP的干重比1、0．5、0．25三種比例混合制作復(fù)合材料，凍干消毒。 3．取新西蘭大白兔40只隨機(jī)

4、分成五組，即：1組，0．5組，0．25組三個實(shí)驗(yàn)組和單純SIS組、單純HA-TCP組兩個對照組，通過植入兔股骨髁直徑6mm，深10mm的缺損，觀察2，4，8，12周時的大體觀察，組織學(xué)，免疫組化檢測以及電鏡觀察。 研究結(jié)果：1．通過組織學(xué)觀察，第12周時，材料混合比例為0．5和0．25組成骨良好，大量新生骨填充骨缺損。0．5比例組的骨缺損修復(fù)且松質(zhì)骨結(jié)構(gòu)形成，材料的降解速度要大于0．25比例組。單純HA-TCP組的新生骨量及材料

5、降解速度要低于0．5和0．25比例組。l比例組少量成骨，骨缺損未能修復(fù)。單純SIS對照組均為纖維組織未能成骨。 2．通過免疫組化檢測，2周時，0．5、0．25比例組出現(xiàn)大量新生血管，而l比例組少量血管。4周時，0．5、0．25比例組新生血管繼續(xù)增多，而l比例組新生血管量明顯少于0．5、0．25比例組。 3．電鏡觀察示，早期l比例材料和單純HA-TCP組中成骨細(xì)胞數(shù)量少，細(xì)胞活性差。而0．5、0．25比例組中成骨細(xì)胞活躍，

6、細(xì)胞器豐富。4周時，1比例材料中成骨細(xì)胞依然較小，細(xì)胞器少；而0．5、0．25比例組和單純HA-TCP組中的成骨細(xì)胞較前更加活躍，可見豐富細(xì)胞器。 研究結(jié)論：1．單純SIS在兔股骨髁缺損模型中形成纖維組織，不能修復(fù)骨缺損。 2．三種比例材料中，0．5和0．25組早期能促進(jìn)大量新生血管形成，細(xì)胞相容性好。在12周時均能有效修復(fù)骨缺損，但就新生骨結(jié)構(gòu)及材料降解方面，0．5比例組要優(yōu)于其它比例組及單純HA-TCP對照組，其成分