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1、目的:在體外實(shí)驗(yàn)條件下,評(píng)價(jià)聚磷酸鈣纖維/磷酸鈣骨水泥復(fù)合材料的細(xì)胞生物相容性及探討聚磷酸鈣纖維和磷酸鈣骨水泥配比不同對(duì)復(fù)合材料細(xì)胞生物相容性的影響,為該復(fù)合材料應(yīng)用于臨床提供一定的理論基礎(chǔ)。
方法:將聚磷酸鈣纖維和磷酸鈣骨水泥按質(zhì)量比0:10、1:9、2:8、3:7、4:6、5:5分別制成復(fù)合材料模塊,按復(fù)合材料1g浸提介質(zhì)10ml的比例,選用含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血清的DMEM作為浸提介質(zhì),制備不同比例復(fù)合材料的浸提液。<
2、br> 設(shè)置陰性對(duì)照組(含10%胎牛血清的DMEM)、實(shí)驗(yàn)組(不同配比復(fù)合材料的浸提液)及陽性對(duì)照組(6.4g/l的苯酚溶液)。
復(fù)蘇并傳代培養(yǎng)MG63細(xì)胞,分別與復(fù)合材料及其浸提液共培養(yǎng):
?。?)使用倒置顯微鏡觀察不同時(shí)間細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;
?。?)采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖情況;
?。?)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡百分率及細(xì)胞周期。
結(jié)果:(1)細(xì)胞在復(fù)合材料表面粘附生長(zhǎng),細(xì)胞形態(tài)正常
3、,生長(zhǎng)良好;
?。?)細(xì)胞與復(fù)合材料浸提液共培養(yǎng),不同時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組生長(zhǎng)良好,增殖迅速,情況基本同陰性對(duì)照組,二者明顯優(yōu)于陽性對(duì)照組,陽性對(duì)照組細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,形態(tài)異常,最終裂解死亡;
(3)MTT法檢測(cè)顯示,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),除陽性對(duì)照組以外,實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組A值逐漸增高,且增高顯著(P=0.000),培養(yǎng)24h、48h、72h時(shí)實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組之間A值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),實(shí)驗(yàn)組(各比
4、例復(fù)合材料浸提液組)之間A值兩兩比較差異亦均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),培養(yǎng)24時(shí),實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組A值稍高于陽性對(duì)照組,但差異尚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),培養(yǎng)48h、72h時(shí),陽性對(duì)照組A值均明顯低于實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組(P=0.000);
?。?)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)可見,培養(yǎng)48h后,實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組細(xì)胞凋亡百分率相近且明顯低于陽性對(duì)照組。
結(jié)論:聚磷酸鈣纖維/磷酸鈣骨水泥復(fù)合材料具有良好的細(xì)胞生物相容性,復(fù)合
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