異氟烷對(duì)大鼠缺血再灌注損傷肝臟ICAM-1表達(dá)及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的影響.pdf

1、目的：本研究旨在通過(guò)建立大鼠部分肝臟缺血再灌注模型，觀察異氟烷麻醉大鼠對(duì)常溫肝臟缺血再灌注損傷的影響，探討異氟烷抗炎作用參與減輕肝臟缺血再灌注損傷的可能機(jī)制。 材料與方法：雌性SD大鼠32只，分為4組，每組8只：(1)PB-Sham組，大鼠行腹腔注射1％戊巴比妥鈉(PB)40mg·kg-1麻醉，進(jìn)行手術(shù)但不阻斷入肝血流。(2)PB-IR組，采用戊巴比妥鈉麻醉后行部分肝臟缺血再灌注(IR)。(3)Iso-Sham組，大鼠僅接受1.

2、0MAC異氟烷(Iso)吸入麻醉，不阻斷血流。(4)Iso-IR組，建立缺血再灌注模型期間采用1.0MAC異氟烷麻醉大鼠。大鼠常溫部分肝臟缺血再灌注損傷模型的建立，通過(guò)夾閉肝動(dòng)脈和門(mén)靜脈左支(支配肝左葉和中葉)，造成約70％肝臟缺血60min、再灌注3h。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)，采取肝組織和血液標(biāo)本。血清ALT和AST作為肝損害的標(biāo)志被檢測(cè)；肝組織內(nèi)髓過(guò)氧化物酶(MPO)活力測(cè)定；用RT-PCR檢測(cè)肝臟組織ICAM-1和TNF-αmRNA轉(zhuǎn)錄水平；肝

3、組織中ICAM-1蛋白表達(dá)變化采用免疫組織化學(xué)染色和免疫印跡(westernblot)方法檢測(cè)；進(jìn)行HE染色行病理學(xué)檢查。 結(jié)果： 1.血清中ALT和AST水平的變化PB-IR組大鼠血清ALT，AST酶水平與其他三組相比較明顯升高(p＜0.05)，Iso-IR組的大鼠血清酶與PB-Sham組和Iso-Sham組相比有明顯增加(p＜0.05)，但是較PB-IR顯著降低(p＜0.05)。 2.肝組織中ICAM-1和T

4、NF-αmRNA變化PB-IR組ICAM-1和TNF-α的基因表達(dá)較其他三組明顯升高(P＜0.05)，Iso減弱ICAM-1和TNF-α基因表達(dá)水平(P＜0.05)。 3.肝組織ICAM-1免疫組化結(jié)果PB-Sham組和Iso-Sham組血竇內(nèi)皮細(xì)胞，肝細(xì)胞、中央靜脈和小葉間靜脈微弱表達(dá)。PB-IR組內(nèi)皮細(xì)胞、中央靜脈和小葉間靜脈管壁強(qiáng)表達(dá)，肝細(xì)胞少量微弱表達(dá)。Iso-IR組可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞和肝細(xì)胞輕度表達(dá)，較PB-IR組弱(P＜0

5、.05)。 4.肝組織ICAM-1蛋白質(zhì)水平測(cè)定雜交帶密度值，以其表示ICAM-1蛋白的表達(dá)水平。PB-IR組較其它三組明顯增加(p＜0.05)。Iso-IR組與PB-Sham組和Iso-Sham組相比表達(dá)水平略增強(qiáng)，但是較PB-IR組明顯減弱，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 5.MPO水平Iso-IR大鼠肝組織內(nèi)MPO與PB-Sham組和Iso-Sham組相比有明顯增加(p＜0.05)，但是較PB-IR顯著降低(

6、p＜0.05)。PB-IR組MPO水平較其他三組相明顯升高(p＜0.05)。 6.HE染色肝組織病理學(xué)改變PB-Sham組和Iso-Sham組的肝組織基本正常。PB-IR組多見(jiàn)局灶性肝細(xì)胞壞死，亦可見(jiàn)肝細(xì)胞凝固性壞死；小葉周邊區(qū)及中央靜脈周圍可見(jiàn)明顯的肝細(xì)胞脂肪變性，肝索結(jié)構(gòu)被破壞。Iso-IR組中央靜脈和肝臟血竇稍擴(kuò)張，淤血。少量肝細(xì)胞變性，可見(jiàn)點(diǎn)狀壞死，肝細(xì)胞脂肪變性，匯管區(qū)可見(jiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肝索結(jié)構(gòu)基本正常存在。

7、 結(jié)論： 1.常溫下對(duì)大鼠行70％的肝臟血流阻斷60min、再灌注3h期間采用異氟烷(1.0MAC)麻醉較使用戊巴比妥鈉麻醉明顯減輕血清ALT和AST。 2.戊巴比妥鈉麻醉大鼠肝臟缺血再灌注后ICAM-1的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)明顯增加。 3.異氟烷較戊巴比妥鈉明顯抑制大鼠肝臟缺血再灌注后。ICAM-1的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)。 4.戊巴比妥鈉麻醉大鼠肝臟缺血再灌注后TNF-α的基因轉(zhuǎn)錄明顯增加，異氟烷抑制TN