擬南芥鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因AtMGT1對(duì)紫花苜蓿（Medicago sativa L）的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、苜蓿是重要的豆科牧草，在世界上享有“牧草之王”的美譽(yù)，種植面積大，應(yīng)用廣泛，不僅是重要的牧草植物，同時(shí)也能夠共生固氮，改善土壤肥力，是目前世界上種植面積最大的經(jīng)濟(jì)作物。鋁毒害是酸性土壤上限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要因素之一。全世界有39.5億公頃酸性土壤，其中可耕土壤面積為1.79億公頃，隨著酸性土壤面積的不斷增大，由于苜蓿對(duì)酸性土壤耐受能力較弱，苜蓿生產(chǎn)受到日益嚴(yán)重的限制。因此選育苜蓿耐鋁品系有重要的意義。生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展為苜蓿耐鋁新品種選

2、育開(kāi)辟了一條新途徑。擬南芥鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因AtMGT1是近年來(lái)研究得比較多的一個(gè)耐鋁相關(guān)基因。前人研究表明，該基因在植物中超量表達(dá)能夠明顯提高細(xì)胞對(duì)Mg2+的利用率，同時(shí)提高對(duì)鋁脅迫的耐受性。本實(shí)驗(yàn)沿用前人所建立的完整實(shí)用的紫花苜蓿轉(zhuǎn)化體系，將AtMGT1基因?qū)氲阶匣ㄜ俎Ｆ贩N保定苜蓿中，并對(duì)AtMGT1基因的功能進(jìn)行了初步分析。主要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、得到了大量紫花苜蓿T0代幼苗和若干成熟的紫花苜蓿植株。對(duì)植株進(jìn)行GUS染

3、色，結(jié)果呈陽(yáng)性，初步驗(yàn)證了p5-AtMGT1載體已經(jīng)成功導(dǎo)入植物基因組。 2、利用轉(zhuǎn)基因苜蓿和野生型苜蓿組培幼苗作為材料，進(jìn)行了鎂缺乏耐受實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)對(duì)轉(zhuǎn)基因苜蓿和野生型苜蓿進(jìn)行了分組，分別置于三種不同Mg2+濃度培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。7d后觀察發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因植株較之野生型苜蓿，對(duì)各程度缺鎂脅迫耐受性更好；而野生型苜蓿則呈現(xiàn)不同程度鎂缺乏癥狀表型。實(shí)驗(yàn)結(jié)果不僅表明AtMGT1的超量表達(dá)能夠提高植物對(duì)Mg2+的利用率，與前人報(bào)道一致，同時(shí)