戊四氮點燃模型大鼠海馬ATF3的表達變化與苔蘚纖維出芽的關系.pdf

1、目的：通過觀察戊四氮（pentylenetetrazole; PTZ）大鼠點燃模型海馬CA3區(qū)及齒狀回區(qū)轉錄激活因子3(activating transcription factor3;ATF3)的動態(tài)表達變化，結合海馬苔蘚纖維出芽(mossy fiber sprouting; MFS)的程度，探討其與MFS的關系及在癲癇過程中的作用。
　　方法：健康SD雄性成年大鼠150只，隨機分為生理鹽水對照組（60只）和PTZ實驗組（90只

2、）。實驗組每日腹腔注射PTZ(30mg/kg);同時生理鹽水組注射等量生理鹽水。按照首次腹腔注射后第3天，1周，2周，4周和6周的時間點分配，將PTZ組及生理鹽水組隨機分為5個亞組。根據(jù)實驗方法的不同再將每個亞組分為三個小組:第一組用于免疫組化及免疫熒光，檢測各時間點ATF3蛋白在海馬各區(qū)的動態(tài)表達及在細胞內表達定位;第二組用于Western Blot，將海馬各區(qū)ATF3表達變化進行半定量分析;第三組用于Timm染色，檢測苔蘚纖維出芽情

3、況，其中實驗組每小組各6只，對照組每小組各4只。
　　結果：
　　1.動物行為學表現(xiàn)
　　大鼠多在連續(xù)注射PTZ21-28天（平均23.7±1.9天）后被點燃。模型點燃率為94.4％，死亡率為5.33％。除了4周和6周組各有一只大鼠未出現(xiàn)癇性發(fā)作外，點燃成功后大鼠出現(xiàn)誘發(fā)發(fā)作及自發(fā)發(fā)作，對照組未出現(xiàn)癇性發(fā)作。
　　2.苔蘚纖維出芽評分
　　實驗組CA3區(qū)與對照組相對應時間點相比MFS評分均有顯著性差異（P＜

4、0.05）。從3天起評分逐漸增加，4周時達高峰，至6周仍維持在較高水平。齒狀回區(qū)MFS評分在實驗組與對照組之間以及各組內不同時間點之間比較均無顯著性差異（P＞0.05）。
　　3.ATF3蛋白的動態(tài)表達
　　免疫組化示在癲癇點燃過程中，實驗組:海馬CA3區(qū)ATF3蛋白表達逐漸上升，在4周組達最高峰，6周組稍有下降(P＜0.05);齒狀回區(qū)ATF3蛋白在點燃過程中無明顯變化(P＞0.05)。對照組:海馬CA3區(qū)及齒狀回區(qū)在3天