非水相體系中蛋白酶-AOT離子對制備及其轉(zhuǎn)酯化活性研究.pdf

1、新型紡織功能性材料是當前材料領(lǐng)域研究開發(fā)的重要方向。而對棉纖維進行復(fù)合、改性來制備新型功能纖維是目前研究的熱點之一。酶催化活性的雙向性使某些蛋白酶能在特定的環(huán)境(如非水相體系)中催化醇類與酯類的轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)，這為棉纖維改性提供了新途徑。
　　 本論文研究了表面活性劑AOT(二辛基磺化丁二酸鈉)含量的測定方法；并使用AOT以離子對轉(zhuǎn)移枯草桿菌蛋白酶(Bacillolysin，EC3.4.24.28)至有機相；考察了影響轉(zhuǎn)移的各因素并

2、通過圓二色譜探討轉(zhuǎn)移前后酶在有機相中的酶結(jié)構(gòu)；探討了轉(zhuǎn)移后酶在有機相中的轉(zhuǎn)酯化活性。
　　 實驗證明:AOT與羅丹明6G(Rhodamine6G)溶液反應(yīng)10 min即可反應(yīng)充分，甲苯萃取9h可以萃取完全；制作離子對時，采用120 rpm磁力攪拌使兩相混合能得到較好的酶轉(zhuǎn)移率，確定作用時間為6h。水相初始pH為5.0有利于離子對的形成及酶蛋白的轉(zhuǎn)移。水相中CaCl2的加入有消除兩相混合過程中的乳化的作用，但是過高濃度的CaCl2

3、會減弱酶分子與AOT間的靜電引力，不利于酶分子與AOT的結(jié)合。水相中酶濃度不變，隨著有機相中AOT初始濃度的增加，酶的轉(zhuǎn)移率呈現(xiàn)增長趨勢。固定異辛烷中AOT濃度，隨著水相中初始酶濃度的增加，轉(zhuǎn)移至有機相中酶量先增加后減少。轉(zhuǎn)移后的酶結(jié)構(gòu)上并沒有較大改變。進入異辛烷的酶分子仍舊保持活性，能催化轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)的進行，但隨著反應(yīng)時間的延長，酶的催化效率出現(xiàn)下降；在轉(zhuǎn)酯化時發(fā)現(xiàn)離子對對水相pH有“記憶”效果。有機溶劑對酶活影響很大，考察了甲苯、異辛