冠心病患者心房肌Cx40、Cx43的變化及在房顫中的作用研究.pdf

1、研究背景:房顫(AF)的觸發(fā)、驅(qū)動和維持機(jī)制目前仍不是很清楚，在觸發(fā)、驅(qū)動機(jī)制方面，有許多研究報道，發(fā)現(xiàn)心臟腔靜脈系統(tǒng)如冠狀靜脈、上下腔靜脈、肺靜脈系統(tǒng)等部位的灶性放電觸發(fā)陣發(fā)性房顫。基礎(chǔ)研究表明：心臟腔靜脈系統(tǒng)存在心房肌細(xì)胞延伸的心肌肌袖，進(jìn)一步研究表明肺靜脈肌袖在胚胎起源上有別于心房肌，而與起源靜脈竇的竇房結(jié)、房室結(jié)、希氏束等傳導(dǎo)系統(tǒng)存在共性。研究還發(fā)現(xiàn)，在肺靜脈心肌層中有與竇房結(jié)的結(jié)樣細(xì)胞非常相似的超微結(jié)構(gòu)的細(xì)胞，從而提示肺靜脈內(nèi)

2、的結(jié)樣細(xì)胞有潛在的起搏功能。因此，肺靜脈肌袖中具有潛在的起搏功能細(xì)胞及與心房組織在胚胎起源的不同使二者的電生理特性存在差異，從而在房顫的發(fā)生中具有重要作用。此外心房肌迷走神經(jīng)張力異常也可能和觸發(fā)機(jī)制有關(guān)，迷走神經(jīng)干、心臟脂肪墊和心臟內(nèi)血管神經(jīng)叢可能使自律細(xì)胞膜電位減小、自律性增高，后除極與觸發(fā)活動誘發(fā)房性早搏、短陣房性心動過速和房顫。 本研究分為以下三部分： 第一部分冠心病患者心房肌Cx40mRNA、Cx40表達(dá)的變化及

3、在心房顫動發(fā)生中的作用 目的：觀察冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴(kuò)大(SR+AD)及心房顫動并左房擴(kuò)大者(AF+AD)左、右心房肌細(xì)胞縫隙連接蛋白(Cx40mRNA、Cx40)的表達(dá)變化、探討Cx40mRNA、Cx40在左、右心耳肌中的表達(dá)、與左心房大小的關(guān)系和在冠心病房顫發(fā)生中的作用。 方法：選擇26例接受冠狀動脈旁路移植術(shù)的冠心病患者為研究對象，26例患者術(shù)前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和

4、心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8例，SR組12例，分別于手術(shù)中切取左、右心耳標(biāo)本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標(biāo)本)。用RT-PCR方法及免疫印跡法檢測Cx40mRNA、Cx40的表達(dá)。 結(jié)果： 1.Cx40mRNA、Cx40表達(dá)量均值在三組患者的右心房肌標(biāo)本中無顯著差異。 2.Cx40mRNA、Cx40表達(dá)量均值在SR+AD、AF+AD組左心耳肌標(biāo)本中比較無顯著性差異。 3.C

5、x40mRNA、 Cx40表達(dá)量均值在SR+AD、AF+AD組左心耳肌標(biāo)本中與三組患者的右心耳肌標(biāo)本比較明顯降低，有顯著性差異。 結(jié)論： 1.左心房擴(kuò)大后左心房肌Cx40mRNA、Cx40表達(dá)下調(diào)。 2.左心房擴(kuò)大并房顫后Cx40mRNA、Cx40表達(dá)無進(jìn)一步下調(diào)。 3.左心房擴(kuò)大和左房Cx40表達(dá)下調(diào)可能是房顫的產(chǎn)生和維持的重要因素。 第二部分冠心病患者心房肌Cx43mRNA和Cx43表達(dá)的變化

6、及在房顫中的作用 目的：觀察冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴(kuò)大(SR+AD)及心房顫動并左房擴(kuò)大者(AF+AD)左、右心房肌細(xì)胞Cx43mRNA和Cx43表達(dá)的變化、探討冠心病患者Cx43mRNA和Cx43表達(dá)的變化及在房顫中的作用。 方法：選擇26例接受冠狀動脈旁路移植術(shù)的冠心病患者為研究對象，26例患者術(shù)前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8

7、例，SR組12例，分別于手術(shù)中切取左、右心耳標(biāo)本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標(biāo)本)。用RT-PCR法檢測Cx43mRNA表達(dá)，用免疫印跡法檢測Cx43蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：Cx43mRNA和Cx43表達(dá)量均值在三組患者的左、右心房肌標(biāo)本中采用方差分析及兩-兩比較均無顯著差異。 結(jié)論： 1.冠心病患者不論是否發(fā)生左房擴(kuò)大和房顫，左右心房肌細(xì)胞中Cx43mRNA表達(dá)無明顯變化。 2.冠心病患者不論是否發(fā)生

8、左房擴(kuò)大和房顫，左右心房肌細(xì)胞中Cx43表達(dá)無明顯變化，3.冠心病患者左房擴(kuò)大和房顫對Cx43mRNA和Cx43的表達(dá)均無明顯影響，說明Cx43mRNA和Cx43表達(dá)的變化對冠心病房顫的發(fā)生影響較少。 第三部分Cx40在冠心病患者左右心房肌中的重構(gòu)及在房顫中的作用 目的：應(yīng)用免疫組化技術(shù)對Cx40進(jìn)行定位、定性、定量，采用激光共聚焦顯微鏡觀察Cx40在冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴(kuò)大(SR+AD)

9、及心房顫動并左房擴(kuò)大者(AF+AD)左、右心房肌細(xì)胞側(cè)-側(cè)和端-端縫隙連接處的分布，與左心房大小的關(guān)系，探討Cx40在左右心房肌細(xì)胞中的分布變化及其在冠心病房顫發(fā)生中的作用。光鏡下觀察心房肌細(xì)胞及細(xì)胞間質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化，Cx40在冠心病患者SR組、SR+AD組及AF+AD組左、右心房肌細(xì)胞側(cè)-側(cè)和端-端縫隙連接處的分布數(shù)，與左心房大小的關(guān)系，探討心房肌細(xì)胞、細(xì)胞間質(zhì)及Cx40重構(gòu)的變化及在冠心病房顫發(fā)生中的作用。 方法：選擇26例接

10、受冠狀動脈旁路移植術(shù)的冠心病患者為研究對象，26例患者術(shù)前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8例，SR組12例，分別于手術(shù)中切取左、右心耳標(biāo)本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標(biāo)本)。用激光共聚焦顯微鏡和光鏡觀察縫隙連接蛋白Cx40在左右心耳肌橫切面和縱切面上的分布及其在側(cè)-側(cè)連接處及端-端連接處的大小和密度變化； 結(jié)果： 1.Cx40在三組患者右心房肌端-端連接處及

11、側(cè)-側(cè)連接處的大小變化無顯著差異。 2.SR+AD、AF+AD組左心房肌Cx40在端-端連接處及側(cè)-側(cè)連接處的大小與SR左心房組和三組右心房肌比較明顯增加。 3.Cx40在端-端連接處及側(cè)-側(cè)連接處的大小變化均值在SR+AD、AF+AD組左心房肌中比較無顯著性差異。 4.左心房擴(kuò)大后不論是否出現(xiàn)房顫，心房肌細(xì)胞、細(xì)胞間的基質(zhì)及Cx40發(fā)生了重構(gòu)?？p隙連接蛋白40呈明顯的異質(zhì)性分布，縫隙連接處平均熒光斑面積增大，中