不同應力加載方式對成骨細胞線粒體膜電位的影響.pdf

1、【研究背景及目的】各類修復體承載基礎牙槽骨的退行性改變已成為現(xiàn)階段影響口腔修復治療效果的重要因素之一。研究和探討促進成骨細胞增殖和功能的生物治療方法是解決上訴問題的唯一途徑。線粒體膜電位△1lr與其功能狀態(tài)密切相關，在細胞不同的分化階段受到不同調(diào)節(jié)維持細胞功能。然而現(xiàn)在對于線粒體在成骨細胞受載后的功能變化尚不甚明了。本實驗旨在闡明不同加載方式對成骨細胞線粒體△1ψ，細胞增殖及分泌功能的影響；分析線粒體功能對力學刺激的響應是否與細胞增殖和

2、分化狀態(tài)一致。 [實驗材料與方法]本實驗使用人類成骨細胞肉瘤來源MG63成骨細胞系，采用調(diào)節(jié)外環(huán)境的膠體滲透壓的方法對細胞進行持續(xù)的均勻牽張，可以通過改變膠體滲透壓和加力時間來研究不同加力方式對成骨細胞線粒體功能的影響。在持續(xù)加力0.5h、4h和6h后檢測線粒體膜電位改變、細胞增殖指數(shù)變化和堿性磷酸酶ALP的表達，每時間點觀察4個實驗組及1個對照組。線粒體膜電位特異的熒光探針JC-1可以通過激光共聚焦顯微鏡和流式細胞術定量研究△

3、ψ的變化。使用PI對75％乙醇固定細胞染色，用流式細胞術檢測細胞周期的改變。通過免疫組化技術觀察ALP在細胞內(nèi)的表達情況，所有結(jié)果利用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進行分析。 【實驗結(jié)果】應力刺激會不同程度地影響線粒體膜電位。在加力0.5小時組，各加力組的成骨細胞線粒體膜電位的功能均有顯著增強，與培養(yǎng)基對照組有顯著性差異；持續(xù)加力4小時后，300mOsM組與163mOsM組與對照組無明顯差異，其余加力值均可顯著提高△ψ：持續(xù)加力

4、6小時后，除240mOsM組△ψ有顯著升高外，其余各組無明顯差異。適當?shù)膽Υ碳τ诰S持成骨細胞功能具有重要意義，特定應力大小可以顯著地影響成骨細胞線粒體的功能，其中低滲277mOsM和240mOsM能夠顯著地增高△ψ。在持續(xù)加力4h組，277mOsM 240mOsM均可最大程度地促進線粒體功能，在其它各組，有且僅有240mOsM的加力可以促進線粒體△ψ達到相應時間組的峰值。而該應力大小也可以最大程度地促進成骨細胞的增殖。 [