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文檔簡介
1、目的: 研究流體剪切力對成骨細胞骨架的影響。 方法: 實驗分為三組,I組(流體剪切力)、II組(流體剪切力+細胞松弛素D,CytochalasinD)、III組(流體剪切力+噻氨酯噠唑,Nocodazole)。分別對I、II、III組施加12 dyne/cm2流體剪應力,應力作用時間分別為:0 min、10 min、30 min、1 h。采用激光共聚焦顯微鏡、免疫熒光顯微鏡技術和免疫熒光染色方法對小鼠成骨細胞骨架
2、進行形態(tài)學觀察、F-肌動蛋白表達的熒光定量分析。 結果: 細胞在不同時間點受到同一剪切應力后,細胞的排列方向發(fā)生改變,細胞內的F-肌動蛋白排列同應力方向一致,隨著應力時間延長到1h,F-肌動蛋白變得厚而豐富,F-肌動蛋白的熒光強度同0時段剪切力組相比明顯增強(P<0.01)。當加入細胞松馳素D后,細胞內F-肌動蛋白結構發(fā)生改變,在力的作用下,細胞內微絲斷裂明顯,隨著拉伸時間的延長,微絲斷裂更為明顯,F-肌動蛋白的熒光強度
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