四妙勇安湯方藥的半仿生提取研究.pdf

1、目的:以四妙勇安湯為例,探討中藥復(fù)方用半仿生提取(SBE)的研究方法.方法:首先用正交設(shè)計(jì),以藁苯內(nèi)酯、揮發(fā)油、萃取物為指標(biāo)成分,優(yōu)選當(dāng)歸揮發(fā)油的超臨界流體萃取(SFE)工藝條件;然后用正交設(shè)計(jì),以綠原酸、阿魏酸、甘草酸、總多糖、醇浸出物、干浸膏為指標(biāo)成分,分別優(yōu)選非揮發(fā)性藥效物質(zhì)的SBE、水提取(WE)、乙醇提取(EE)的工藝條件;最后分別以化學(xué)成分指標(biāo)、藥理效應(yīng)指標(biāo)、血清HPLC指紋圖譜對(duì)3種方法的提取液進(jìn)行比較,綜合評(píng)判3種提取方

2、法的優(yōu)劣,確定最優(yōu)工藝.結(jié)果:GC-MS檢出的SFE萃取物與水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油的主要成分基本相同,揮發(fā)油、藁苯內(nèi)酯的提取率分別為水蒸氣蒸餾法的1.62倍、1.90倍;優(yōu)選出的SFE工藝條件為:當(dāng)歸粉碎成過(guò)4目篩粗粉,在30MPa、65℃條件下萃取2 h,分離Ⅰ條件:12MPa、40℃,分離Ⅱ條件:6MPa、40℃,驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明SFE工藝條件穩(wěn)定可行.SBE液的6種指標(biāo)成分的綜合評(píng)分值最高,抗炎、降低血液粘度、抑制血小板聚集、提高S

3、OD活力、降低MDA含量等藥理作用最強(qiáng);SBE液、WE液、EE液給藥后2 h血清的共有峰重疊率、相似度差異較小, LC-MS檢測(cè)出的10個(gè)特征峰的分子量相同,SBE液、WE液給藥后5h血清的特征峰數(shù)量未發(fā)現(xiàn)變化,但EE液的特征峰明顯減少,提示某些成分在體內(nèi)消除速度快,藥效維持時(shí)間短.綜合評(píng)判結(jié)果:SBE工藝優(yōu)于WE工藝、EE工藝,四妙勇安湯的非揮發(fā)性藥效物質(zhì)以用SBE工藝條件提取為佳,即藥材粉碎成過(guò)4目篩的粗粉,分別加20％乙醇提取3次

4、,溶劑用量依次為10、8、8倍,pH值依次為3.50、7.50、8.50,提取時(shí)間依次為1.5、1.0、1.0 h;驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明SBE工藝條件穩(wěn)定可行.結(jié)論:該研究將化學(xué)成分指標(biāo)、藥效指標(biāo)、血清指紋譜有機(jī)的結(jié)合起來(lái)進(jìn)行SBE工藝研究,既優(yōu)選工藝條件,又優(yōu)選工藝路線.因此,"SBE法"既符合中醫(yī)藥本原理論,又能充分融合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和手段,是對(duì)中藥提取思路與方法的拓展和創(chuàng)新,該論文進(jìn)一步豐富和完善了中藥復(fù)方用SBE法提取的研究設(shè)計(jì)思路與