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1、目的:觀察限制飲食后追趕生長的成年大鼠體內(nèi)胰島素抵抗(insulin resistance,IR)水平,檢測(cè)骨骼肌肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1(carnitine palmitoyl transferase,CPT-1)mRNA表達(dá)水平、活性和骨骼肌脂質(zhì)沉積情況,并探討追趕生長致胰島素抵抗的作用機(jī)制。
方法:6周齡SPF 級(jí)SD 雄性大鼠30只,購于同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn),體重190~230g。按體重隨
2、機(jī)分為兩大組即追趕生長組和正常對(duì)照組,每組15只。追趕生長組又隨機(jī)分為3組,R4組(60[%]熱卡飲食4周)和R4N2,R4N4組各代表60[%]熱卡飲食4周后正常喂養(yǎng)2周和4周,每組5只;而正常對(duì)照組也隨機(jī)分為與追趕生長各組年齡匹配的N4,N6和N8組,每組5只。計(jì)算每周熱卡攝入總量平均值和稱取并計(jì)算每周大鼠體重平均值;造模結(jié)束后檢測(cè)各組大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)、計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR=FINS×FB
3、G/22.5)、內(nèi)臟脂肪重量/體重比值變化;通過半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)骨骼肌內(nèi)CPT-1mRNA的表達(dá)情況,用比色法檢測(cè)CPT-1 活性水平;對(duì)骨骼肌行冰凍切片后油紅O 染色,并在光鏡下觀察骨骼肌脂質(zhì)沉積情況。
結(jié)果:(1)60[%]熱卡飲食第4周,追趕生長組大鼠體重顯著低于正常對(duì)照組(P<0.01);在追趕期間,體重逐漸追趕,但直到追趕4周末仍沒有追趕到正常組(P<0.05);(2)與正常對(duì)照組相比
4、,追趕生長組大鼠在追趕生長2周(R4N2組)即開始出現(xiàn)內(nèi)臟脂肪堆積(P<0.05),R4N4組同時(shí)還出現(xiàn)高胰島素血癥(P<0.05)和HOMA-IR的顯著升高(P<0.01);(3)追趕生長組大鼠在限食期間(R4組)開始出現(xiàn)骨骼肌內(nèi)CPT-1 mRNA表達(dá)下降(P<0.05),在追趕生長期呈進(jìn)行性下降,且在R4N4組中同時(shí)出現(xiàn)CPT-1 活性的下降(P<0.05);(4)油紅O 染色顯示R4N2組和R4N4組大鼠的骨骼肌中有明顯的脂質(zhì)沉
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