泮托拉唑緩解腫瘤惡病質骨骼肌消耗及其機制.pdf

1、目的：
　　本實驗通過建立腫瘤惡病質小鼠模型，研究泮托拉唑對惡病質狀態(tài)下的骨骼肌消耗的保護作用及其可能的相關機制，為惡病質的進一步研究提供新的思路，并為臨床應用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　48只雄性BALB/c小鼠，按照隨機數(shù)字表分為6個組，每組8只，分別為：正常對照組（NC）、惡病質組（CC）、低濃度治療組（CL）、中濃度治療組（CM）、高濃度治療組（CH）、生理鹽水組（CS）。荷瘤小鼠于右前肢腋下接種小鼠結腸腺

2、癌細胞c26，以建立小鼠腫瘤惡病質模型；正常對照組于相同部位注射等量的PBS緩沖液。每日監(jiān)測小鼠的體重、腫瘤的大小以及各組小鼠的自發(fā)活動。待接種腫瘤細胞的小鼠進入到惡病質狀態(tài)后，治療組采用不同濃度的泮托拉唑灌胃，生理鹽水組采用等量生理鹽水灌胃，NC組和CC組不作任何干預。待藥物治療2周后，收集標本檢測相關指標。ELISA法檢測血清IL-6及TNF-α水平。Real-time PCR檢測腓腸肌JAK2及STAT3 mRNA表達情況；Wes

3、tern blot檢測腓腸肌p-JAK2，p-STAT3，F(xiàn)bx32和MuRF1蛋白表達情況。免疫組化法檢測腓腸肌組織中Fbx32和MuRF1的表達。HE染色觀察腓腸肌形態(tài)變化。采用SPSS17.0軟件分析數(shù)據(jù)。
　　結果：
　　1.腫瘤惡病質模型成功建立荷瘤小鼠在接種腫瘤細胞后第5天，皮下可觸及腫瘤結節(jié)生長；接種后第12天，荷瘤小鼠腫瘤明顯增大，體重較正常對照組明顯下降（P＜0.05），并且出現(xiàn)了自發(fā)性活動減少(P＜0.0

4、5)、毛發(fā)暗淡無光、精神虛弱等癥狀，提示荷瘤小鼠進入惡病質狀態(tài)。
　　2.小鼠體質量及腓腸肌變化接種腫瘤細胞后第5天，荷瘤小鼠皮下可觸及腫瘤結節(jié)，但各組小鼠體重無差異（P＞0.05）；接種c26細胞后第12天，荷瘤小鼠較正常組體重明顯減輕（P＜0.05）；在泮托拉唑干預2周后，治療組小鼠較生理鹽水組體重有不同程度增加，且高濃度組小鼠體重增加最為明顯（P＜0.05）。實驗結束時，治療組小鼠較生理鹽水組腓腸肌重量及橫切面積均有不同程度

5、增加，且高濃度組小鼠體重增加最為明顯（P＜0.05）；高濃度組小鼠的腫瘤重量較生理鹽水組也有明顯減輕（P＜0.05）。
　　3.小鼠血清中炎性因子水平變化與正常對照組相比，血清炎性因子IL-6和TNF-α水平在惡病質小鼠中顯著升高（P＜0.05）。在使用泮托拉唑干預后，各濃度組較生理鹽水組血清炎性因子都有不同程度降低，尤其高濃度組降低得最為顯著（P＜0.05）。
　　4.小鼠炎性通路JAK2/STAT3表達變化與正常對照組相

6、比，炎性通路JAK2和STAT3的mRNA表達水平在惡病質小鼠中顯著升高（P＜0.05），并且p-JAK2和p-STAT3的蛋白表達水平在惡病質小鼠中也明顯增高（P＜0.05）。在使用泮托拉唑干預后，各濃度治療組同生理鹽水組比較，JAK2和STAT3的mRNA表達水平以及p-JAK2和p-STAT3的蛋白表達水平都有不同程度降低，尤其以高濃度組降低最為顯著（P＜0.05）。
　　5.小鼠骨骼肌泛素蛋白酶體系統(tǒng)變化與正常對照組比較，

7、惡病質組小鼠腓腸肌中的MuRF1和Fbx32的蛋白表達水平明顯升高（P＜0.05），而泮托拉唑干預后，不同濃度干預組小鼠的MuRF1和Fbx32的蛋白表達水平較生理鹽水組均降低，且高濃度組降低最為明顯（P＜0.05）。
　　結論：
　　小鼠C26細胞接種于BALB/c小鼠成功建立腫瘤惡病質模型。
　　泮托拉唑能明顯改善腫瘤惡病質一般情況，增加體質量，緩解骨骼肌萎縮，抑制腫瘤生長，并且高濃度泮托拉唑具有更好的保護作用。<