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1、目的:研究EphA2在高眼壓狀態(tài)下視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的表達(dá)情況及作用,進(jìn)一步闡明青光眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的損傷機(jī)制。
方法:利用C57BL/6小鼠建立急性高眼壓模型,7天后取得小鼠視網(wǎng)膜進(jìn)行HE染色并計(jì)算內(nèi)層視網(wǎng)膜厚度,Brn-3a免疫熒光染色計(jì)數(shù)RGCs數(shù)量及丟失率,Western blot檢測(cè)視網(wǎng)膜EphA2蛋白表達(dá),RT-PCR檢測(cè)視網(wǎng)膜EphA2的mRNA表達(dá),免疫組化檢測(cè)視網(wǎng)膜全層及免疫熒光檢測(cè)視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞層的EphA2
2、表達(dá)及定位情況。
結(jié)果:小鼠急性高眼壓后第七天,HE染色后測(cè)量?jī)?nèi)層視網(wǎng)膜厚度高眼壓(AOH)組比非高眼壓(non-AOH)組降低(P<0.0001,t=11.2);Brn-3a熒光染色視網(wǎng)膜平鋪片AOH組的RGCs數(shù)目比 non-AOH組明顯減少(P<0.0001,t=14.12)。RGCs丟失率也比 non-AOH組高(P<0.0001,t=16.93);Western blot結(jié)果提示EphA2蛋白在視網(wǎng)膜AOH組中的表達(dá)
3、水平較non-AOH組升高(P=0.0498。t=2.450);RT-PCR中EphA2 mRNA在AOH組中的表達(dá)水平較non-AOH組明顯升高(P=0.0004。t=4.435);免疫組化結(jié)果顯示EphA2蛋白在AOH組中的表達(dá)水平較non-AOH組明顯升高(P=0.0087。t=6.125),且AOH組EphA2主要分布在內(nèi)層視網(wǎng)膜,而在RGCs細(xì)胞層及視網(wǎng)膜血管明顯;免疫熒光結(jié)果顯示EphA2蛋白在視網(wǎng)膜AOH組中的表達(dá)水平較n
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