體內(nèi)轉(zhuǎn)染腺病毒載體Ad-CMV-hTGF-β1對(duì)兔椎間盤退變保護(hù)作用的研究.pdf

1、　　目的：探究體內(nèi)轉(zhuǎn)染腺病毒載體Ad/CMV-hTGF-β1對(duì)兔椎間盤退變的保護(hù)作用，主要是對(duì)椎間盤髓核細(xì)胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)的表達(dá)的影響，并初步討論其可能的作用機(jī)制，為椎間盤退變的生物學(xué)預(yù)防與治療提供理論基礎(chǔ)。方法：純種成年新西蘭大白兔20只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組10只。采取腹部手術(shù)入路，逐層切開軟組織，暴露腰椎間盤，用微量注射器取本院骨科實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的腺病毒為載體的Ad/CMV-hTGF-β1(滴度

2、為6x106pfu)20微升直接注射于腰4，5椎間盤髓核內(nèi)；對(duì)照組僅進(jìn)行相應(yīng)的外圍手術(shù)操作，椎間盤未做任何處理。手術(shù)后3周取出椎間盤組織，常規(guī)石蠟包埋，組織切片，通過(guò)普通HE染色觀察髓核組織細(xì)胞學(xué)形態(tài)；用免疫組織化學(xué)方法染色顯示各組椎間盤組織髓核細(xì)胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原含量的變化和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)的表達(dá)情況；并用VIDAS圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。結(jié)果：普通HE染色結(jié)果顯示2組椎間盤髓核組織形態(tài)基本相同。免疫組織化學(xué)染色顯示：

3、實(shí)驗(yàn)組椎間盤髓核細(xì)胞內(nèi)Ⅰ型膠原的表達(dá)比對(duì)照組低，OPTDM值分別為實(shí)驗(yàn)組0.1804±0.0211，對(duì)照組0.2768±0.0161，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異有顯著性(P＜0.05)；Ⅱ型膠原的表達(dá)結(jié)果則正好相反，實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組高，OPTDM值分別為實(shí)驗(yàn)組0.6936±0.0312，對(duì)照組0.5068±0.0235，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異有顯著性(P＜0.05)；實(shí)驗(yàn)組椎間盤髓核細(xì)胞FGF的表達(dá)比對(duì)照組高，OPTDM值分別為實(shí)驗(yàn)組0.4354±0.019