2型糖尿病患者乳腺癌易感基因FGFR2和ZNF365多態(tài)性分析.pdf

1、背景:近年來(lái)，乳腺癌和2型糖尿病的發(fā)病率逐年升高，在世界范圍內(nèi)對(duì)公眾健康產(chǎn)生了巨大影響。流行病學(xué)證據(jù)顯示，2型糖尿病患者發(fā)生乳腺癌的幾率明顯增高，2型糖尿病是多種惡性腫瘤發(fā)生的高危因素?，F(xiàn)有研究尚未闡明上述兩類疾病的生物學(xué)聯(lián)系，國(guó)內(nèi)外有關(guān)回顧性研究和體外實(shí)驗(yàn)報(bào)道較多關(guān)注于高血糖、胰島素、胰島素樣生長(zhǎng)因子、胰島素抵抗和藥物等諸多因素，而針對(duì)遺傳和基因方面的研究尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。
　　 基因多態(tài)性是指在生物群體中，同時(shí)存在多種不連續(xù)的變

2、異型或基因型或等位基因。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)是基因多態(tài)性中最常見一種，指的是基因組水平上單個(gè)核苷酸變異所引起的DNA序列多態(tài)性。SNP因?yàn)槠涿芏雀摺⒂写硇?、遺傳穩(wěn)定性及檢測(cè)方法的自動(dòng)化特點(diǎn)，已作為一類遺傳學(xué)標(biāo)記被廣泛應(yīng)用于遺傳學(xué)分析中。本實(shí)驗(yàn)選取已確定的與乳腺癌發(fā)病密切相關(guān)的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2（fibroblast growth factors receptor2

3、， FGFR2）和鋅指蛋白(zinc fingerprotein，ZNF)基因，從基因水平探討2型糖尿病患者易發(fā)乳腺癌的機(jī)制。
　　 FGFR2作為腫瘤易感基因在國(guó)內(nèi)外多有報(bào)道，F(xiàn)GFR2屬酪氨酸激酶受體家族，功能與多種腫瘤生物學(xué)行為有關(guān)，包括促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和增強(qiáng)細(xì)胞活性，其基因突變與多種惡性腫瘤發(fā)生相關(guān)，如子宮內(nèi)膜癌、胃癌、肺癌及乳腺癌等。鋅指蛋白通過結(jié)合鋅自我折疊形成短的穩(wěn)定的手指狀結(jié)構(gòu)，通過與靶分子DNA、RNA、DN

4、A-RNA序列特異性結(jié)合，以及與自身或其他鋅指蛋白結(jié)合，使其在基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育等方面發(fā)揮重要作用。一個(gè)通過全基因組關(guān)聯(lián)研究(genome-wideassociation study, GWAS)的大樣本實(shí)驗(yàn)報(bào)道，ZNF365基因rs10822013是東亞女性乳腺癌發(fā)病的明顯易感因素。
　　 目的:本研究旨在通過分析FGFR2和ZNF365基因單核苷酸多態(tài)性在2型糖尿病患者中的基因突變頻率，揭示2型糖尿病患者易發(fā)乳

5、腺癌的遺傳學(xué)機(jī)制，為闡明這兩種疾病關(guān)系提供理論依據(jù)，指導(dǎo)乳腺癌早期篩查開展，并采取相應(yīng)干預(yù)措施以降低乳腺癌發(fā)病率。
　　 方法:選取2型糖尿病患者514例，體檢健康者393例作為正常對(duì)照組。采集空腹外周靜脈血3ml，根據(jù)Wizard基因組DNA純化試劑盒操作步驟，從中提取DNA，應(yīng)用連接酶檢測(cè)反應(yīng)(Ligase Detection Reaction，LDR)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)SNP位點(diǎn)的檢測(cè)，并計(jì)算出基因頻率。經(jīng)Hardy-Weinb

6、erg平衡試驗(yàn)，利用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，并假定年齡作為一個(gè)危險(xiǎn)因素，進(jìn)行了相對(duì)危險(xiǎn)度分析，計(jì)算p值、OR值及95％CI可信區(qū)間值，分析乳腺癌易感基因多態(tài)性與2型糖尿病的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.FGFR2基因rs2420946單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分析在＜40歲的人群，糖尿病組rs2420946的基因型(CC，CT, TT)頻率分別為46.21％、46.17％、7.62％，對(duì)照組為29.33％、52

7、.91％、15.76％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在40-49歲的人群，糖尿病組rs2420946的基因型(CC，CT, TT)頻率分別為31.16％、53.32％、15.52％，對(duì)照組為30.62％、50.61％、18.77％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);在50-59歲的人群，糖尿病組rs2420946的基因型(CC，CT, TT)頻率分別38.81％、47.91％、13.28％，對(duì)照組為

8、37.93％、42.55％、19.52％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在≥60歲的人群，糖尿病組rs2420946的基因型(CC，CT, TT)頻率分別37.25％、47.71％、15.04％，對(duì)照組為49.44％、53.14％、4.42％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 2.FGFR2基因rs2981582單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分析在＜40歲的人群，糖尿病組rs2981582的基因型

9、(CC，CT, TT)頻率分別為53.82％、46.18％、0，對(duì)照組為40.00％、51.75％、10.25％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在40-49歲的人群，糖尿病組rs2981582的基因型(CC，CT, TT)頻率分別為41.37％、44.63％、13.70％，對(duì)照組為66.00％、79.63％、19.37％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05);在50-59歲的人群，糖尿病組rs298158

10、2的基因型(CC，CT, TT)頻率分別46.32％、43.00％、10.68％，對(duì)照組為48.36％、39.00％、12.64％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在＞60歲的人群，糖尿病組rs2981582的基因型(CC，CT, TT)頻率分別44.71％、45.14％、10.14％，對(duì)照組為49.00％、49.00％、2.00％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 3.FGFR2基因r

11、s1219648單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分析在＜40歲的人群，糖尿病組rs1219648的基因型(AA，AG, GG)頻率分別為46.13％、46.13％、7.74％，對(duì)照組為29.91％、51.73％、18.26％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p＞0.05）;在40-49歲的人群，糖尿病組rs1219648的基因型(AA，AG, GG)頻率分別為29.33％、56.91％、13.76％，對(duì)照組為31.26％、50.00％、18.74％，

12、兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在50-59歲的人群，糖尿病組rs1219648的基因型(AA，AG, GG)頻率分別37.24％、48.76％、14.00％，對(duì)照組為35.64％、44.8％、19.48％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在≥60歲的人群，糖尿病組rs1219648的基因型(AA，AG, GG)頻率分別為36.96％、46.89％、16.15％，對(duì)照組為42.86％、53.06％、4

13、.08％，兩組間GG基因型分布的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.029)，與AA型比較，攜帶GG基因型者乳腺癌發(fā)生的危險(xiǎn)性增加(OR=4.59，95％CI=1.04-20.29)。
　　 4.ZNF365基因rs10822013單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分析在＜40歲的人群，糖尿病組rs10822013的基因型(CC，CT, TT)頻率分別為23.08％、69.23％、7.69％，對(duì)照組為39.08％、44.83％、16.09％，兩組間基因型

14、分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在40-49歲的人群，糖尿病組rs10822013的基因型(CC，CT, TT)頻率分別為27.59％、50.00％、22.41％，對(duì)照組為29.41％、47.65％、1.34％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在50-59歲的人群，糖尿病組rs10822013的基因型(CC，CT, TT)頻率分別26.45％、47.10％、26.45％，對(duì)照組為35.63％、44.83％、19.

15、54％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05）;在≥60歲的人群，糖尿病組rs10822013的基因型(CC，CT,TT)頻率分別33.23％、48.76％、18.01％，對(duì)照組為28.57％、48.98％、22.45％，兩組間基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:老年2型糖尿病患者FGFR2基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)rs1219648GG基因型突變頻率明顯增高，GG基因型突變可能與2型糖尿病患者易發(fā)乳