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文檔簡介
1、目的:篩選有效的提取沙蜇刺胞毒素方法.比較兩種方法粗提沙蜇刺胞毒素的溶血活性(方法A粗提沙蜇刺胞毒素、方法B粗提沙蜇刺胞毒素).將所得沙蜇刺胞毒素進行動物實驗,分析毒素的性質(zhì),為刺胞皮炎的預防和治療提供依據(jù).方法:(1)方法A采取Burnett改良法,方法B采取新鮮沙蜇自溶法.(2)比較方法A和方法B兩種粗提沙蜇刺胞毒素的溶血活性.取16名健康人的抗凝血制成0.5％紅細胞懸液.將每例新鮮紅細胞懸液均分為16份,每份均為1ml.將兩種方法
2、粗提沙蜇刺胞毒素用10mM PBS(PH7.4)分別配制成不同濃度的6個實驗組、陰性對照組(10mMPBS,PH7.4)、陽性對照組(10mMPBS 1.0ml和0.5%SDS2 μ l),各組均取1ml,并加入1ml 0.5%紅細胞懸液,4℃孵育過夜,分光光度計測蛋白濃度,計算粗提沙蜇刺胞毒素的50%溶血率.比較兩種方法粗提沙蜇刺胞毒素的溶血活性.(2)將100只小鼠按照隨機的方法5組,各組小鼠均經(jīng)尾部靜脈注射濃度分別為2.700mg
3、/kg、2.16 0mg/kg、1.728 mg/kg、1.3842 mg/kg、1.106 mg/kg粗提沙蜇刺胞毒素0.5ml,觀察記錄小鼠注射粗提沙蜇刺胞毒素后各系統(tǒng)器官的反應以及24小時小鼠的死亡數(shù),并將死亡小鼠快速尸解,取腦、肺、肝臟組織切片,觀察組織變化.結(jié)論:粗提沙蜇刺胞毒素可以致人類紅細胞溶血,兩種方法粗提沙蜇刺胞毒素溶血活性沒有顯著性差異.粗提沙蜇刺胞毒素和其他的劇毒動物毒素一樣有溶血活性,對小鼠具有致死性.我們對于引
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