肝細(xì)胞凝膠包埋培養(yǎng)用于藥物肝毒性的研究.pdf

1、體外篩選技術(shù)可以快速和早期地淘汰毒性過(guò)大的候選藥物，縮短開發(fā)周期，提高新藥開發(fā)的成功率，然而，目前的體外模型難以準(zhǔn)確反映藥物的毒性行為。因此，本文以我們自主開發(fā)的體外組織化培養(yǎng)微型反應(yīng)器(形式為凝膠包埋肝細(xì)胞培養(yǎng)于中空纖維膜內(nèi))為基礎(chǔ)，以利福平和異煙肼為活性代謝產(chǎn)物導(dǎo)致肝毒性的代表藥物，四環(huán)素為致脂肪變性的代表藥物，胺碘酮為致磷脂變性的代表藥物，水楊酸鈉為線粒體毒性的代表藥物，分別驗(yàn)證該微型反應(yīng)器用于藥物肝毒性檢測(cè)的可行性，并與傳統(tǒng)的單

2、層貼壁培養(yǎng)方式比較。
　　 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微型反應(yīng)器內(nèi)大鼠肝細(xì)胞中檢出的毒性濃度與藥物在大鼠體內(nèi)產(chǎn)生毒性時(shí)的血藥濃度一致，且能正確反映藥物體內(nèi)毒性機(jī)理；而單層貼壁肝細(xì)胞對(duì)藥物毒性不敏感，且不能正確反映藥物體內(nèi)的毒理。其次，我們還利用微型反應(yīng)器培養(yǎng)的人肝細(xì)胞研究了利福平和異煙肼合用對(duì)人和大鼠肝毒性的種屬差異，研究結(jié)果也與大鼠和臨床報(bào)道的體內(nèi)結(jié)果一致。最后，該微型反應(yīng)器還用于篩選針對(duì)不同毒性機(jī)理的保肝藥物，我們發(fā)現(xiàn)中藥有效成分甘草酸可抗

3、活性代謝產(chǎn)物毒性，而苦參堿和水飛薊賓則可有效抑制胺碘酮導(dǎo)致的磷脂變性。
　　 由于在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)聚砜中空纖維膜對(duì)疏水性藥物(如胺碘酮和利福平)有嚴(yán)重的吸附，我們對(duì)聚砜膜材料進(jìn)行聚乙二醇接枝以增加其親水性，并將接枝產(chǎn)物與聚砜共混制備得到親水中空纖維共混膜，從而極大降低了藥物的吸附，使重新構(gòu)建的中空纖維膜反應(yīng)器所反映的藥物肝毒性情況更接近體內(nèi)。
　　 總之，將肝細(xì)胞凝膠包埋培養(yǎng)于聚乙二醇親水改性的聚砜中空纖維膜微型反應(yīng)器中，可