脂聯(lián)素對MG-63細胞AMPK、ACC磷酸化和增殖的影響.pdf

1、目的:本研究主要探討人脂聯(lián)素重組體(Adiponectin)對MG-63細胞單磷酸腺苷激活的蛋白激酶(Adenosine monophosphate activatedprotein kinase，AMPK)、乙酰輔酶A羧化酶（Acetyl carboxylase，ACC）磷酸化和細胞增殖的影響。
　　 方法:選擇處于對數(shù)生長期的MG-63細胞、SaOS-2細胞、hFOB1.19細胞，提取蛋白后Western Blot檢測三種細

2、胞脂聯(lián)素受體1（Adiponectin receptorl，AdipoR1）的表達水平。將對數(shù)生長期的骨肉瘤細胞株MG-63中分別加入5ml含脂聯(lián)素的培養(yǎng)基（濃度1ug/ml），處理不同的時間，Western Blot檢測AMPK、ACC蛋白磷酸化水平，選擇最佳的脂聯(lián)素處理時間;根據(jù)脂聯(lián)素最佳處理時間，選擇不同濃度的脂聯(lián)素作用于呈對數(shù)生長的MG-63細胞Western Blot檢測AMPK、ACC磷酸化水平，確定脂聯(lián)素最佳作用濃度。依據(jù)

3、最佳作用時間及最佳濃度，將PBS作為對照，相應濃度脂聯(lián)素作處理組，Western Blot檢測AMPK、ACC磷酸化水平，明確脂聯(lián)素對骨肉瘤MG-63細胞AMPK、ACC磷酸化的影響。CCK-8法檢測脂聯(lián)素對MG-63細胞增殖的影響。
　　 結(jié)果:與正常成骨細胞hFOB1.19相比，骨肉瘤細胞株MG-63細胞和SaOS-2細胞AdipoR1水平顯著增高（MG-63細胞:P=0.001;SaOS-2細胞:P=0.001）;脂聯(lián)素對

4、MG-63細胞最佳作用時間30min(P=0.005)，最佳作用濃度0.1ug/ml(P=0.007)，與對照組相比，脂聯(lián)素組可以顯著促進MG-63細胞AMPK(P=0.001)、ACC(P=0.001)磷酸化;短時間內(nèi)(24h)脂聯(lián)素對MG-63細胞增殖無明顯抑制作用(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:AdipoR1在骨肉瘤細胞中表達水平高于正常成骨細胞;一定濃度的脂聯(lián)素可以增強AMPK、ACC的磷酸化，短時間刺激脂聯(lián)素對MG-6