小白菊內(nèi)酯對人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63增殖的抑制作用.pdf

1、背景與目的:小白菊內(nèi)酯是從芳香類植物中提取的一種倍半萜內(nèi)酯化合物,是艾菊的主要活性成分。作為一種己經(jīng)有數(shù)百年歷史的傳統(tǒng)藥物,小白菊內(nèi)酯過去主要用于治療偏頭痛、風(fēng)濕病及炎癥。近年來研究發(fā)現(xiàn),小白菊內(nèi)酯具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,在體外可抑制多種腫瘤細(xì)胞株的生長增殖,并誘導(dǎo)其凋亡,比如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和多發(fā)性骨髓瘤。此外,小白菊內(nèi)酯還可以增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對其他多種抗腫瘤藥物的敏感性。但是至今還沒有對于骨肉瘤細(xì)胞作用的相關(guān)報(bào)道,本研究的目的是探討小

2、白菊內(nèi)酯對人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63的增殖抑制作用。
　　 方法:本實(shí)驗(yàn)所用的人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63在含有10％的小牛血清的DMEM培養(yǎng)液,于37℃,5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),給予不同濃度的小白菊內(nèi)酯后,于不同時(shí)間點(diǎn),通過倒置顯微鏡觀察骨肉瘤細(xì)胞的形態(tài),同時(shí)用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測MG-63細(xì)胞的增殖能力的變化,應(yīng)用公式計(jì)算出不同濃度的小白菊內(nèi)酯對MG-63細(xì)胞的抑制率。為了進(jìn)一步獲得一個(gè)明確的

3、量化的對于MG-63細(xì)胞凋亡的影響,用Annexin V和PI雙染色方法檢測細(xì)胞的凋亡百分率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用(均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差)表示,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,均數(shù)間進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),P＜0.05被認(rèn)為有顯著差異。
　　 結(jié)果:細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察:倒置顯微鏡下,對照組細(xì)胞呈梭形,細(xì)胞核呈圓形,致密,處在一個(gè)良好的生長狀態(tài)。而治療組細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,邊緣粗糙,有不同程度的萎縮。MTT結(jié)果表明;不同濃度的小白菊內(nèi)酯對MG-63細(xì)胞的體外

4、生長具有不同程度的抑制作用;隨著濃度的加大及作用時(shí)間的延長,其抑制作用逐步增強(qiáng),說明小白菊內(nèi)酯對MG-63細(xì)胞生長的抑制作用,呈濃度和時(shí)間依賴性。流式細(xì)胞儀結(jié)果表明:隨著小白菊內(nèi)酯濃度的升高,(4080120μmol)凋亡細(xì)胞明顯增多,早期凋亡率分別為(4.15％,7.56％,11.23％),晚期凋亡率和壞死率分別為(1.87％,3.06％,4.33％)早期凋亡和晚期凋亡都有變化,而早期凋亡變化幅度較大。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)以人