Nucleostemin在大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞誘導分化中的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討Nucleostemin（NS）在大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細胞誘導分化中的機制及作用。
　　 方法：取材選用的是4～6周齡雄性S-D大鼠的雙側(cè)脛骨和股骨骨髓基質(zhì)細胞，并進行原代及傳代培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)至第3代設置對照組，分別將混合骨髓間充質(zhì)干細胞用普通培養(yǎng)液和礦化培養(yǎng)液培養(yǎng)。依次通過相差倒置顯微鏡觀察細胞生長、MTT法檢測細胞增殖、堿性磷酸酶（AKP）和茜素紅鈣染色共同分析細胞的成骨活性。免疫組化SABC法及免疫熒光法檢

2、測NS在細胞中的表達情況，在普通培養(yǎng)基和成骨細胞誘導培養(yǎng)基作用下比較NS分別的表達情況。
　　 結(jié)果：在礦化培養(yǎng)基誘導下大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞其NS的表達較普通培養(yǎng)基培養(yǎng)下的表達明顯減弱，且呈時間依賴性衰減。骨髓間充質(zhì)干細胞在礦化液作用下可誘導為團狀分布的成骨細胞。成骨細胞的NS表達則為陰性。MTT檢測顯示礦化液培養(yǎng)細胞生長潛伏期長，對數(shù)生長期較對照組延長。
　　 結(jié)論：①此方法可以獲得大量骨髓間充質(zhì)干細胞。②骨髓間充質(zhì)干

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