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文檔簡介
1、目的:
通過建立大鼠80%肝門靜脈結(jié)扎和大鼠80%肝切除模型,觀察相應(yīng)門靜脈結(jié)扎和肝切除對術(shù)后生存率及肝臟再生的作用及影響。
方法:
健康SD雄性大鼠108只,體重(220±20)g,分成3組。A組:行80%肝門靜脈結(jié)扎(PVL)組;B組:行80%肝切除(PH)組;C組:為假手術(shù)(Sham)組,僅翻動(dòng)肝臟各分葉。A、B、C三組每組12只,觀察三組大鼠生存率。A、B、C三組分別于24h、48h、72h、120
2、h各處死6只大鼠,檢測血清ALT、AST并行肝重體重比檢測;A、B兩組行免疫組化法檢測肝增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)指數(shù)及采用免疫蛋白印跡法檢測細(xì)胞周期蛋白Dl(CyclinD1)的蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
?、俅笫笮g(shù)后生存率:A組門靜脈結(jié)扎組術(shù)后120h10只大鼠存活,術(shù)后生存率83.3%。B組肝切除組術(shù)后120h7只大鼠存活,術(shù)后生存率58.3%,與A組相比,存在顯著差異(P<0.05)。C組假手術(shù)組中術(shù)后大鼠均存活,A組
3、與C組比較(P>0.05)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B組與C組比較存在顯著性差異(P<0.05)。
②肝重體重比的變化:24h時(shí)A組肝重體重比為1.32±0.05、B組為1.48±0.03;C組為1.28±0.08,B組高于A組,有顯著性差異(P<0.05);第48h、72h、120h時(shí)A組肝重體重比分別為2.11±0.10、2.52±0.09、3.28±0.07;B組分別為:1.91±0.08、2.38±0.06、3.17±0.03;C
4、組分別為:1.32±0.07、1.36±0.05、1.38±0.02, A組均高于B組,有顯著性差異(P<0.05);C組與A、B組相比,術(shù)后24h時(shí)B組顯著高于C組,有顯著性差異(P<0.01);術(shù)后48h、72h和120h時(shí),A、B兩組肝重體重比均顯著大于C組,有顯著性差異(P<0.01)。
?、垩錋LT、AST的變化:三組術(shù)后血清ALT、AST水平均于術(shù)后24h達(dá)到高峰,并隨時(shí)間的推移逐漸降低。A組和B組相比,術(shù)后24h
5、、48h、72h時(shí)B組的ALT、AST水平高于A組(P<0.05);第120h時(shí)A組、B組兩組相比無顯著差異(P>0.05)。C組與A、B組相比,術(shù)后24h、48h、72h時(shí)C組ALT、AST水平均明顯低于A、B兩組,有顯著性差異(P<0.01);第120h時(shí)C組與A、B組相比無顯著差異(P>0.05)。
?、芨谓M織PCNA標(biāo)記指數(shù)的變化:在24h時(shí)B組PCNA指數(shù)達(dá)到最高值為42.31±1.14、A組為22.14±2.01,B
6、組明顯高于A組,有顯著性差異(P<0.01);48h時(shí)A組PCNA指數(shù)達(dá)到最高值為45.61±1.54、B組為27.48±2.13,A組明顯高于B組,有顯著性差異(P<0.01);72h、120h時(shí)A組PCNA指數(shù)分別為14.72±1.03、4.27±0.09;B組為11.68±1.21、3.96±0.11,A組PCNA指數(shù)均高于B組,有顯著性差異(P<0.05)。
?、莞谓M織CyclinD1相對表達(dá)量的變化:CyclinD1在
7、A組早期僅有輕度表達(dá),高峰出現(xiàn)在術(shù)后48h,而B組高峰出現(xiàn)在術(shù)后24h。在24h時(shí)B組和A組 CyclinD1相對表達(dá)量分別為0.58±0.09、0.21±0.05,B組CyclinD1相對表達(dá)量高于A組,有顯著性差異(P<0.01);在48h時(shí)B組和A組 CyclinD1相對表達(dá)量分別為0.23±0.04、0.61±0.11,A組CyclinD1相對表達(dá)量明顯優(yōu)于B組,有顯著性差異(P<0.01);72h、120h時(shí)B組CyclinD
8、1相對表達(dá)量分別為0.17±0.02、0.05±0.01;A組為0.25±0.03、0.09±0.02,A組CyclinD1相對表達(dá)量均高于B組,有顯著性差異(P<0.05)。
結(jié)論:
1、大鼠80%肝門靜脈結(jié)扎導(dǎo)致結(jié)扎肝葉進(jìn)行性萎縮,未結(jié)扎肝臟代償性增生,作為研究肝臟再生的動(dòng)物模型具有制作方便,穩(wěn)定可靠地特點(diǎn)。
2、大鼠80%肝門靜脈結(jié)扎較之于80%肝切除,門靜脈結(jié)扎組殘余肝臟細(xì)胞受損更輕微,有利于術(shù)后早
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