健脾化痰活血法治療脂肪肝的臨床與實驗研究.pdf

1、本課題根據(jù)導(dǎo)師張惠臣教授的臨床經(jīng)驗，認為脂肪肝的病機理，主要由于脾虛、濕停、氣滯、血瘀，且互為因果，相互影響。故提出健脾化痰活血法治療脂肪肝，并由此組方，構(gòu)建以柴芍二陳湯加味為主的基本方：茯苓、半夏、陳皮、柴胡、白芍、澤瀉、黃精、丹皮、紅花、丹參、山楂、何首烏，作為脂肪肝的治療用藥，選用香砂六君子湯為對照藥，開展了嚴密設(shè)計的隨機對照(單盲)臨床研究。為進一步探討其治療作用機制，我們采用高脂飲食復(fù)制了高脂血癥性脂肪肝動物模型，同時施加藥物

2、干預(yù)，開展了系列實驗研究。同時通過古今文獻研究，臨床研究，動物實驗研究等方面進行配伍研究，從方劑學(xué)的角度，闡明健脾化痰活血法配伍治療脂肪肝的合理性及配伍之間的關(guān)系，為臨床和進一步的研究提供有指導(dǎo)性價值的組方配伍法則。 第一部分文獻研究 脂肪肝(Fatty Liver)是肝細胞發(fā)生脂肪變性的一種脂類代謝紊亂性的疾病，當(dāng)肝細胞內(nèi)脂質(zhì)超過肝濕重的5％即為脂肪肝。脂肪肝中醫(yī)辨證多屬“積聚”、“脅痛”等病范疇。我國脂肪肝的發(fā)病率，

3、已由20世紀80年代的10％左右，增加到了20世紀90年代的15％，特別是最近10年里，脂肪肝呈現(xiàn)明顯的增多，而造成肝纖維化的發(fā)病率則高達25％，且1.5-8 ％的患者可能發(fā)展為肝硬化。所以對其進行深入的研究，尋求有效的治療方法，提高治療效果，無疑具有重大的社會意義。 古今文獻研究表明，脂肪肝病因病機多因肝郁氣滯、飲食傷脾、脾虛濕停，并由氣滯濕停導(dǎo)致瘀血留滯，終成瘀血、氣滯、停濕相兼為患。而祖國醫(yī)學(xué)對本病的治療，多用健脾、化痰、

4、活血等法治療，往往能取得良好的效果。 第二部分健脾化痰活血治療脂肪肝的臨床研究 1 研究方法:在確立嚴格的診斷標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)和療效評定標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，采用隨機、均衡、對照的原則，將74 例合格受試對象分為治療組健脾化痰活血法加飲食控制38例，對照組健脾化痰祛瘀法加飲食控制36例，用單盲法進行治療前后和組間療效觀察，療程均為三個月，觀察比較患者在治療前后臨床癥狀、血脂、肝臟B型超聲影像學(xué)、肝功能等方面的變化。

5、 2 研究結(jié)果: 2.1 病患體重變化治療組和對照組的體重治療前后都有所減輕 (P<0.05，P<0.01)，說明兩法均有一定的減輕體重的作用。健脾化痰活血法降低體重的差值明顯比對照組大，但差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義 (P>0.05)。 2.2 兩組之間療效的比較 2.2.1 臨床癥狀改善情況治療組38例，治療后臨床癥狀改善的有效率平均92.32％；對照組36例，治療后臨床癥狀改善的有效率平均 61.22％，治療組

6、臨床癥狀的改善明顯優(yōu)于對照組。 治療組38例，顯效18例、有效12例、無效8例，顯效率47.35％，總有效率78.95％；對照組36例，顯效2例、有效17例、無效17例，顯效率5.56％，總有效率52.78％。兩組間總有效率比較有顯著性差異(P<0.05)；治療組明顯高于對照組。 2.2.2 兩組患者血清檢查的變化治療組血清中 GOT、GPT、T-C、T-G，治療前后均值改變較大 (P<0.01)其差異有統(tǒng)計學(xué)極顯著性意

7、義。而對照組血清中的GOT、GPT、T-C、T-G治療前后均數(shù)的改變較小，其差異統(tǒng)計學(xué)顯著性意義較低(P<0.05)。治療組的療效明顯的優(yōu)于對照組。 2.2.3 兩組之間B超肝脂程度的變化治療前兩組中B超的輕、中、重?zé)o明顯差異；治療后治療組B超的輕、中、重均明顯改善，而對照組復(fù)查雖有所進步，但明顯差于治療組。 2.3、藥物安全性測定及副作用在整個治療過程中兩組患者血、尿、大便常規(guī)檢查，結(jié)果均正常。治療組除少數(shù)病例(3例患

8、者)于服藥初期出現(xiàn)食欲減退、上腹部不適、睡眠欠佳，2例出現(xiàn)便溏現(xiàn)象，但程度均輕微，且都于服藥一周后自行緩解，并無其它副作用。對照組除4例于服藥初期出現(xiàn)口干、睡眠欠佳，程度輕微，并未見其它副作用。 3 研究結(jié)論: 健脾化痰活血法加飲食控制對脂肪肝具有明顯降低血清 GOT、GPT、血脂 T-C、T-G 的作用。健脾化痰活血法對降低脂肪肝患者血清 GOT、GPT、血脂 T-C、T-G，改善肝脂程度B超聲像圖變化上均明顯優(yōu)于對照

9、組。 第三部分健脾化痰活血法治療脂肪肝的實驗研究 1 研究方法:健康雄性SD大鼠60只，隨機分為4組。即(1)正常對照組(簡稱正常組)：灌服生理鹽水；(2)模型對照組(簡稱模型組)：灌服生理鹽水：(3)陽性藥對照組(簡稱對照組)：阿托伐他汀10mg/kg灌胃，每天1次。(4)試驗藥物組：灌服健脾化痰活血法中藥(柴芍二陳加味方)。除正常對照組外，其余各組均以脂肪乳劑2ml灌胃，每天1次。同時，各治療組灌服陽性對照藥或治療藥

10、，正常組、模型組灌服等量生理鹽水。連續(xù)灌胃1周。 2 檢測指標(biāo): (1)血清指標(biāo)： TC，TG， ALT、AST，HDL-C 和 LDL-C。 (2)病理指標(biāo)：常規(guī)石臘包埋，切片，HE 染色，觀察肝組織病理變化，冰凍切片蘇丹Ⅳ染色察肝組織脂肪變性情況。 3 研究結(jié)果: 3.1 血脂變化情況各造模組脂肪乳劑2ml灌胃1周后，血清TC和LDL-C含量即有明顯升高，與正常組相比差別具有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(

11、P<0.05)，提示成功建立高脂血癥大鼠模型。給予各實驗組不同的處理措施1周后，對照組和試驗組血清TC和LDI-C含量明顯低于模型組，其差別具有統(tǒng)計學(xué)極顯著意義(P<0.01)，說明陽性藥阿托伐他汀和中藥均具有顯著的抵抗脂肪乳劑誘發(fā)高TC和LDL-C 血癥的作用。而且與同時期的正常組相比，其差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)，提示兩組的TC和LDL-C 均值已恢復(fù)至正常水平)。給藥前各組間血清TG含量的差別無統(tǒng)計學(xué)意義，但是給藥1周

12、后對照組和試驗組平均TG含量卻低于正常組，其差別具有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P<0.05)。給藥前后各組間血清HDL-C含量的差別均無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。 正常組各指標(biāo)在兩周中的差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。模型組各指標(biāo)在兩周中的差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。對照組給藥后的平均HDL-C含量比給藥前升高，差別有統(tǒng)計學(xué)極顯著性意義(P<0.01)。試驗組給藥后的TC和LDL-C平均含量比給藥前明顯降低，

13、HDL-C含量比給藥前升高，差別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P<0.05，P<0.01.和P<0.01)。 3.2 動脈粥樣硬化指數(shù)(AI)給予不同處理措施前，模型組、陽性組和試驗藥組AI顯著高于正常組，差別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P<0.05、P<0.01和P<0.01)，而模型組、陽性對照組和試驗藥組間差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。給予不同處理措施1周后，正常組、陽性對照組和試驗藥組顯著低于模型對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(

14、P<0.01、P<0.05和P<0.01)，正常組、陽性藥對照組和試驗藥組間差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。正常組和模型組在處理前后AI差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。陽性藥對照組和試驗藥組AI顯著低于處理前，陽性對照組降低5％-64％，差別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P<0.05)；試驗藥組降低43％-70％，差別有統(tǒng)計學(xué)極顯著性意義(P<0.01)。提示中藥和陽性藥阿托伐他汀均具有降低AI的作用，與阿托伐他汀相比中藥的作用可

15、能更優(yōu)。 3.3 體重變化情況實驗過程中動物無死亡，身體狀況良好，皮毛潔白光亮，攝食飲水及日?；顒訜o異常，無腹瀉，體重增加，變化趨勢一致，組間差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P>0.05)。 3.4 肝功能的變化正常對照組各指標(biāo)在兩周中差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義 (P>0.05)。模型對照組各指標(biāo)在兩周中差別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義 (P<0.05)，表明肝功能繼續(xù)損害。陽性對照組給藥后的的平均ALT含量較給藥前降低 (P<0.05)，差

16、別有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義，AST 平均含量較給藥前無明顯降低(P>0.05)。試驗藥組給藥后的ALT和AST平均含量較給藥前有明顯降低 (P<0.05，P<0.01)。試驗藥組與陽性對照組給藥后ALT平均含量比較無明顯差別 (P>0.05)，AST平均含量差別明顯，有統(tǒng)計學(xué)顯著性意義(P<0.05)。 3.5 肝勻漿含脂質(zhì)情況正常組各指標(biāo)在兩周中差別無統(tǒng)計學(xué)顯著性意義 (P>0.05)。 3.6 肝臟病理檢測結(jié)果正常對照組大

17、鼠肝臟在僅見個別肝細胞中有少量細少脂滴散在分布于細胞核周圍，肝竇清晰可見，肝索排列整齊。 4 研究結(jié)論: 本論文從抑制外源性膽固醇的吸收、抑制內(nèi)源性膽固醇的生成、保護肝功能、促進膽固醇從肝臟中轉(zhuǎn)運幾個方面進行了組方作用及其機制的研究。健脾化痰活血法方藥可明顯降低肝臟轉(zhuǎn)氨酶的升高的作用，而阻止脂肪從腸內(nèi)吸收的作用不明顯。由于脂類代謝的復(fù)雜性，故可認為本法及其方藥具有促進脂類從肝臟轉(zhuǎn)運的作用，同時具有明顯的保護肝功能的作用，