晚期妊娠婦女圓韌帶組織中膠原蛋白Ⅰ、Ⅲ的表達(dá)改變及其意義.pdf

1、目的:女性盆底功能障礙性疾病(pelvic floor dysfunction,PFD)主要包括盆腔臟器脫垂(pelvic organ prolapse,POP)和女性壓力性尿失禁(stress urinary ineontinence,SUI)。女性盆底功能障礙性疾病被喻為“社交癌”,嚴(yán)重影響了婦女的身心健康,然而其發(fā)病原因、發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚,我國已進(jìn)入老齡化社會,該疾病引起廣大婦科醫(yī)務(wù)人員的重視。研究表明該病可同時存在多個病因,

2、如妊娠、分娩、多產(chǎn)、家族遺傳史、盆底組織薄弱、肥胖等均是發(fā)生PFD的高危因素。本研究通過對妊娠晚期婦女及同年齡組非妊娠婦女,子宮圓韌帶組織結(jié)構(gòu)的觀察及膠原蛋白Ⅰ、Ⅲ表達(dá)水平的檢測,從組織學(xué)和分子生物學(xué)水平探討圓韌帶組織結(jié)構(gòu)膠原蛋白Ⅰ、Ⅲ含量的變化及與盆底功能障礙性疾病的關(guān)系。
　　 材料與方法:
　　 1.研究對象:選取自2008年6月至2010年12月河北省人民醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的妊娠足月(孕37-40周)行剖宮產(chǎn)手術(shù)的初

3、產(chǎn)婦15例作為實(shí)驗(yàn)組。選取同期因卵巢非功能性腫瘤需手術(shù)的同齡(見附表1)非妊娠女性14例為對照組。所有研究對象均排除POP及SUI;無Ehlers-DantoS綜合征或Marfan'S綜合征等膠原異常疾病及其它相關(guān)疾病;無晚期妊娠及分娩史;無生殖道、泌尿系感染;無膀胱功能障礙;近3個月內(nèi)未服用激素類藥物;無腹部及陰道手術(shù)史。于術(shù)中取圓韌帶組織(0.5×0.5×0.5cm3),并經(jīng)福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋。部分組織切片行HE染色,以明確

4、組織學(xué)結(jié)構(gòu)。本研究所有對象術(shù)前均簽署知情同意書。
　　 2.實(shí)驗(yàn)試劑:
　　 主要免疫組化試劑有兔抗人Ⅰ、Ⅲ型膠原單克隆抗體、S-P試劑盒、液體DAB酶底物顯色試劑盒、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉,過氧化氫等。檢測實(shí)驗(yàn)組和對照組患者圓韌帶組織中CollagenⅠ、Ⅲ的表達(dá)水平。
　　 3.結(jié)果判定:采用免疫組化半定量法,每張切片隨機(jī)選取細(xì)胞分布均勻的5個高倍(×400)視野作為觀察區(qū),評價標(biāo)準(zhǔn):以細(xì)胞漿出現(xiàn)黃色

5、作為陽性,將陽性細(xì)胞百分比和細(xì)胞染色強(qiáng)度分別計分。①染色程度:不著色記為0分,淡黃色記為1分,黃色記為2分,棕黃色記為3分。②陽性細(xì)胞的百分比分級:0％為0分,1-10％為1分,11-50％為2分,51-80％為3分,81-100％為4分。將兩評分相乘所得的總分?jǐn)?shù)作為加權(quán)染色強(qiáng)度,0分為陰性;1-4分為弱陽性(+);5-8分為陽性(++);9-12分為強(qiáng)陽性(+++)。其中將(+-+++)定義均按陽性計算。以上染色深度均以多數(shù)細(xì)胞和間質(zhì)

6、的呈色反應(yīng)判定,為減少主觀片面性,每例分別由3位病理科醫(yī)師各自閱片,然后核對所得結(jié)果,獲得共識。
　　 4.所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)組與對照組的均數(shù)比較用t檢驗(yàn):樣本表達(dá)陽性率的比較用卡方檢驗(yàn)。各檢驗(yàn)方法均以P=0.05為檢驗(yàn)顯著性水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.各組一般情況比較實(shí)驗(yàn)組和對照組在年齡與體重指數(shù)上均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 2.光鏡下圓韌帶的組織

7、學(xué)表現(xiàn)(HE染色)實(shí)驗(yàn)組女性子宮圓韌帶組織中膠原纖維形態(tài)略紊亂,肌纖維變形,甚至可見膠原纖維斷裂,平滑肌束細(xì)碎現(xiàn)象。而對照組圓韌帶膠原排列致密、整齊;偶可見局部斷裂、排列紊亂的膠原。
　　 3.免疫組化結(jié)果
　　 3.1.兩組圓韌帶組織中CollagenⅠ的表達(dá)水平比較實(shí)驗(yàn)組及對照組患者圓韌帶組織中CollagenⅠ表達(dá)陽性率分別為26.7％、71.4％。統(tǒng)計學(xué)分析顯示:實(shí)驗(yàn)組與對照組比較,X2=5.811,P=0.01

8、6(P＜0.05),有顯著性差異。
　　 3.2.兩組圓韌帶組織中CollagenⅢ的表達(dá)水平比較實(shí)驗(yàn)組及對照組患者圓韌帶組織中CollagenⅢ表達(dá)陽性率分別為13.3％、57.1％。統(tǒng)計學(xué)分析顯示:實(shí)驗(yàn)組與對照組比較,X2=6.152,P=0.013(P＜0.05),有顯著性差異。
　　 結(jié)論:
　　 1.晚期妊娠患者圓韌帶組織中CollagenⅠ的表達(dá)較對照組顯著減少,CollagenⅠ含量減少直接導(dǎo)致盆底

9、支持組織抗張能力下降,可能無法維持正常子宮的解剖位置,故CollagenⅠ可通過此機(jī)制參與PFD的發(fā)生。
　　 2.晚期妊娠患者圓韌帶組織中ConagenⅢ的表達(dá)較對照組顯著減少,導(dǎo)致盆底支持組織的韌性降低,故CollagenⅢ的表達(dá)減少可能是導(dǎo)致PFD發(fā)生的重要原因。
　　 3.多次妊娠的婦女發(fā)生PFD的可能性增加,這可能是由于多次妊娠導(dǎo)致CollagenⅠ、Ⅲ的表達(dá)減少更為明顯,對盆底支持組織的影響更為嚴(yán)重,從而導(dǎo)致