人羊膜上皮細胞移植治療大鼠脊髓損傷的實驗研究.pdf

1、本研究分成四個部分：　　一構(gòu)建羊膜上皮細胞培養(yǎng)平臺，并對其生物學(xué)特性進行初步探索　　采用細胞培養(yǎng)技術(shù)分離、培養(yǎng)人羊膜上皮細胞。對人羊膜上皮細胞進行神經(jīng)標(biāo)志物(GFAP、MAP-2、Nestin)的免疫組化檢測；觀測HAECs條件培養(yǎng)液對大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞的影響；將HAECs進行成年健康大鼠的體內(nèi)移植實驗，觀察細胞存活和遷移情況。在本部分實驗中，成功建立了羊膜上皮細胞培養(yǎng)平臺；證實羊膜上皮細胞能表達神經(jīng)特異性標(biāo)志物和神經(jīng)干細胞特異性標(biāo)志

2、物，能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子；移植到動物體內(nèi)能較長時間存活并具有一定的遷移能力，不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。本部分實驗數(shù)據(jù)表明，HAECs可以成為新的神經(jīng)移植的種子細胞?！　《⒋笫蠹顾钃p傷模型，觀察大鼠在不同程度脊髓損傷下的病理變化、自發(fā)恢復(fù)過程以及最終恢復(fù)的程度，為正確評價移植療效提供實驗依據(jù)。　　本部分實驗數(shù)據(jù)表明，脊髓的全切、半切都能造成穩(wěn)定、可重復(fù)的脊髓損傷模型，但半切損傷不會引起明顯的運動、膀胱功能障礙；脊髓全切的功能障礙明顯，形態(tài)

3、變化清晰，是評價治療措施效果的較好模型?！　∪龑⒃囵B(yǎng)的人羊膜上皮細胞移植到大鼠脊髓損傷灶，觀察細胞存活情況以及是否能改善大鼠后肢運動、膀胱功能?！?在本部分實驗中發(fā)現(xiàn)，羊膜上皮細胞比較容易獲得移植所需求的數(shù)量，15×15cm2大小的羊膜上可以培養(yǎng)出1×106個左右細胞；移植到損傷脊髓后能長期存活(八周)并與宿主整合良好，無免疫排斥反應(yīng)；羊膜上皮細胞移植能促進軸突的再生和脊髓功能的恢復(fù)?！　∷牟捎靡浦厕D(zhuǎn)染GDNF的人羊膜上皮細