致呼吸系統(tǒng)感染中銅綠假單胞菌整合子與耐藥性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 分析致呼吸系統(tǒng)感染的銅綠假單胞菌的耐藥性，調(diào)查銅綠假單胞菌中Ⅰ類、Ⅱ類和Ⅲ類整合子的存在狀況，以及整合子中基因盒的種類和排列；分析細(xì)菌攜帶基因盒與耐藥表型的關(guān)系以及整合子與銅綠假單胞菌多重耐藥性的關(guān)系，探討整合子介導(dǎo)的銅綠假單胞菌多重耐藥的機(jī)制。 方法： 應(yīng)用全自動細(xì)菌分析儀bioMerieux VITEK 2，測定97株銅綠假單胞菌對16種抗菌藥物的敏感性：應(yīng)用簡并引物PCR方法，同時擴(kuò)增整合子5’保守

2、區(qū)的Ⅰ類、Ⅱ類和Ⅲ類整合酶基因，對陽性PCR物用限制性內(nèi)切酶Hinf I作限制片段長度多態(tài)性(RFLP)分析進(jìn)行整合子分類；對整合酶陽性標(biāo)本進(jìn)行整合子可變區(qū)的擴(kuò)增并對大小相同的整合子進(jìn)行酶切分析；對純化后的整合子進(jìn)行DNA測序。 結(jié)果： 97株銅綠假單胞菌對16種抗菌藥物的耐藥率為4.2％～100％。72株(74.2％)細(xì)菌為多重耐藥菌(耐受3種以上抗菌藥物)。20.6％(20/97)的銅綠假單胞菌中檢出整合子，均為Ⅰ類

3、整合子，未檢出Ⅱ類和Ⅲ類整合子。20株整合酶陽性的銅綠假單胞菌中有17株含有基因盒，基因盒大小有3種類型：979bp、1833bp和2337bp。測序結(jié)果顯示有二氫葉酸還原酶基因dfr17和dhfrXII；氨基糖苷類修飾酶基因aadA2、aadA5、aadB和aac(6)-Ⅱ；羧基青霉素類耐藥基因blaCARB-8。Ⅰ類整合子陽性的菌株對抗菌藥物的耐藥率普遍比整合子陰性的菌株高，Ⅰ類整合子與細(xì)菌多重耐藥的發(fā)生有關(guān)。 結(jié)論：