西寧市一原發(fā)性開角型青光眼家系Myocilin基因exon 3多態(tài)性研究.pdf

1、目的： 對西寧市一原發(fā)性開角型青光眼（primary open angle glaucoma，POAG）家系進行Myocilin（MYCO）基因單核苷酸多態(tài)性分析研究，檢測該基因外顯子3（exon3）的突變情況。 方法： 1、對原發(fā)性開角型青光眼患者及其親屬和正常人進行系統(tǒng)眼壓、視力、眼底、視野及房角等眼科檢查。 2、全基因組DNA提取：取青光眼患者以及其親屬和正常人外周血，采用DNA分離試劑盒提取。提取

2、的DNA經(jīng)分光光度計和瓊脂糖凝膠電泳鑒定。 3、MYCO基因exon3區(qū)域的擴增：根據(jù)MYCO基因exon3序列合成3對特異性引物，以全基因組DNA為模板，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)法進行擴增。 4、PCR產(chǎn)物的鑒定：瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物。 5、PCR產(chǎn)物的純化：擴增產(chǎn)物用QIAquick Gel Kit凝膠回收試劑盒進行純化。 6、將純化后的產(chǎn)物直接進行基因測序和單核苷酸多態(tài)性分析。 結(jié)果：

3、 經(jīng)檢測在該原發(fā)性開角型青光眼家系中發(fā)現(xiàn)，所有的青光眼患者和可疑者的MYCO基因exon3區(qū)域檢出Pro370Leu位點的突變，即MYCO蛋白第370位氨基酸由脯氨酸（Pro）變?yōu)榱涟彼幔↙eu）。正常對照的10例中未發(fā)現(xiàn)。 結(jié)論： 該青光眼家系患者中檢出MYCO基因exon3區(qū)域1個突變位點，造成MYCO蛋白第370位氨基酸由脯氨酸（Pro）變?yōu)榱涟彼幔↙eu），此單核苷酸多態(tài)性變化造成了MYCO蛋白的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)生