低血糖對新生大鼠海馬及枕葉影響的HR1H-MRS和病理學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 建立穩(wěn)定、可靠的胰島素誘導(dǎo)新生大鼠單次持續(xù)低血糖模型，應(yīng)用離體高分辨磁共振波譜技術(shù)(HR1H-MRS)分析該模型大鼠海馬及枕葉皮層代謝物的變化，同時輔以病理檢測其神經(jīng)元損傷情況，研究新生期單次持續(xù)低血糖對大鼠海馬及枕葉皮層的影響，同時探索新生兒低血糖腦損傷的有效干預(yù)方法。
　　 方法:
　　 將135只SD新生大鼠按隨機(jī)數(shù)字法，分為對照組、低血糖組及干預(yù)組，各45只。每組根據(jù)不同處死時間，再分為新生

2、期（出生后8天）、幼年期（出生后21天）及成年期（出生后60天），各15只。出生后第7天，所有大鼠禁食2h，低血糖組大鼠予腹腔注射胰島素40U/kg，誘導(dǎo)新生大鼠低血糖;干預(yù)組則在低血糖組模型的基礎(chǔ)上予腹腔注射3-氨基甲苯酰胺(30mg/g);對照組則給予等量生理鹽水。每個時期，各組隨機(jī)選取9只大鼠分離并萃取雙側(cè)海馬、枕葉皮層用于1H-MRS研究。余下6只大鼠取全腦經(jīng)石蠟包埋后用于Tunel及免疫組織化學(xué)染色檢測神經(jīng)元損傷及GFAP陽性

3、細(xì)胞增生情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.代謝物變化:
　　 1.1.海馬與新生期對照組相比，新生期低血糖組大鼠共有7種代謝物的濃度發(fā)生顯著改變(P＜0.05)，分別為谷氨酰胺(Gln)及?；撬?Tau)濃度上升，琥珀酸(Suc)、天冬氨酸(Asp)、肌醇(my-Ins)、N-乙酰天門冬氨酸（NAA）及甘氨酸(Gly)濃度下降。新生期干預(yù)組與新生期低血糖組相比，my-Ins、Gly濃度回升;且其與新生期對照組相比，

4、my-Ins、NAA、Gly恢復(fù)正常，而Suc、Asp、Gln、Tau濃度仍有改變，但改變程度較新生期低血糖組明顯減輕;動物隨訪至幼年期及成年期時，三組大鼠海馬代謝物變化均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 1.2.枕葉皮層與各時期對照組相比，新生期低血糖組僅有膽堿(Cho)濃度上升，幼年期僅有乳酸(Lac)濃度上升，而成年期乳酸(Lac)及丙氨酸(Ala)濃度下降，肌酸(Cre)及NAA濃度則上升，三個時期其他代謝物變化均無

5、統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 2.病理情況
　　 2.1.變性神經(jīng)元檢測較新生期對照組，新生期低血糖組海馬CA1、CA3及DG區(qū)的變性神經(jīng)元均增多，以DG區(qū)最為明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.001)。較新生期低血糖組，新生期干預(yù)組海馬CA1、CA3及DG區(qū)的變性神經(jīng)元均減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.001);較新生期對照組，新生期干預(yù)組海馬DG區(qū)的變性神經(jīng)元增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.001)，而CA1、C

6、A3區(qū)恢復(fù)正常。動物成長至幼年期及成年期時，各組海馬各區(qū)變性神經(jīng)元均無明顯增多，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。較各時期對照組，枕葉皮層低血糖組變性神經(jīng)元均無明顯增多，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 2.2 GFAP陽性細(xì)胞檢測幼年期及成年期海馬、枕葉皮層各組間GFAP陽性細(xì)胞數(shù)量均未見明顯增多或減少，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.新生大鼠單次持續(xù)低血糖對海馬及枕葉皮層代

7、謝模式的影響、神經(jīng)元的損傷存在區(qū)域性差異。
　　 2.新生期單次持續(xù)低血糖可引起新生期海馬代謝物一系列可逆性的改變及神經(jīng)元短暫、可逆的損傷。
　　 3.新生期單次持續(xù)低血糖后大鼠新生期枕葉皮層代謝無顯著改變，但隨訪至幼年期及成年期時能量相關(guān)代謝物出現(xiàn)改變，這可能與星形膠質(zhì)細(xì)胞對神經(jīng)元保護(hù)及供能的加強和成年期神經(jīng)元活性的代償性增高有關(guān)。
　　 4.3-AB能有效減輕新生大鼠單次持續(xù)低血糖引起的海馬區(qū)代謝紊亂及神經(jīng)元