抗壞血酸協(xié)同砷劑抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的療效和機理的實驗研究.pdf

1、本課題是載藥骨水泥局部治療骨肉瘤研究系列課題的前期研究，通過細(xì)胞大小、形態(tài)、增殖、分裂、移行、粘附以及死亡、凋亡等細(xì)胞毒性觀察，研究三氧化二砷(Arsenic Trioxide，As2O3)抗骨肉瘤MG-63的作用并確定As2O3抗骨肉瘤MG-63細(xì)胞的有效濃度;研究抗壞血酸(ascorbic acid，AA，即維生素C)協(xié)同As2O3抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的作用，并確定AA協(xié)同As2O3抗骨肉瘤MG-63的最佳濃度;通過Illumi

2、na人全基因芯片表達(dá)譜分析及PCR驗證，為尋找AA協(xié)同As2O3抗人骨肉瘤的可能途徑提供參考依據(jù)。
　　第一部分 AA協(xié)同As2O3抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的體外療效研究
　　目的:研究AA和As2O3抗人骨肉瘤MG-63的協(xié)同作用。
　　方法:以人骨肉瘤細(xì)胞MG-63為體外模型，用62.5μM AA與1μM As2O3單獨或聯(lián)合處理細(xì)胞，利用新型連續(xù)活細(xì)胞圖像采集和分析平臺Cell-IQ(continuous liv

3、e cell imaging and analysis platform, Cell-IQ)實時觀察細(xì)胞的生長情況和形態(tài)學(xué)的變化。
　　結(jié)果:我們的研究顯示1μM As2O3和62.5μ MAA單獨處理都可抑制骨肉瘤細(xì)胞MG-63的生長并誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。當(dāng)1μ M As2O3和62.5μ MAA聯(lián)合處理細(xì)胞后，較單獨處理組細(xì)胞抑制及促凋亡效果更明顯。
　　結(jié)論:AA和As2O3抗人骨肉瘤MG-63可起到協(xié)同作用，這一結(jié)果為臨床

4、治療骨肉瘤的療效提供了新的思路和實驗依據(jù)。
　　第二部分 AA協(xié)同As2O3抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的機制研究
　　目的:擾動是藥物間相互作用是生命體中的系統(tǒng)性問題的關(guān)鍵特點，特別是癌癥研究中。研究AA和As2O3抗人骨肉瘤MG-63的協(xié)同作用的可能機制。
　　方法:利用經(jīng)As2O3和AA處理的人類癌細(xì)胞系MG-63，我們期望知道藥物互作在宏觀水平對該細(xì)胞系轉(zhuǎn)錄組的影響。我們首先利用混合線形模型模擬As2O3和AA的互

5、作。利用該模型，我們得出了As2O3影響AA或AA影響As2O3起作用的基因集。其次，我們利用SVD(Singular Value Decomposition)方法分析了單個和協(xié)同作用下的基因表達(dá)模式的癌細(xì)胞系MG-63的基因表達(dá)譜。我們從基因表達(dá)譜找到了一些不同的代表了藥物交互作用的基因模式。為解釋這些不同的基因表達(dá)模式，我們也對找到的模式進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄調(diào)控子網(wǎng)絡(luò)的分析。另外，我們利用GO(Gene Ontology)和信號通路數(shù)據(jù)庫考察