卵巢癌裸鼠模型不同時(shí)期生長分化因子-15表達(dá)的研究.pdf

1、目的:通過建立人卵巢腺癌細(xì)胞裸鼠原位模型，觀察不同腫瘤時(shí)期的外周血以及腫瘤組織中GDF-15動(dòng)態(tài)表達(dá)規(guī)律，以探討其在卵巢腫瘤診斷中的價(jià)值。
　　方法:將人卵巢腺癌細(xì)胞(OVCAR-3)細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇后常規(guī)細(xì)胞傳代培養(yǎng)，選擇傳代至第3代時(shí)腫瘤細(xì)胞作為原位移植模型注射細(xì)胞，隨機(jī)將48只BALB/c雌性裸鼠中分為3個(gè)時(shí)間段組（4周、6周、8周組），予以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后開腹，在左側(cè)卵巢外囊膜下（注射器）注射5μL細(xì)胞混懸液后關(guān)

2、腹，培養(yǎng)觀察。根據(jù)分組情況，分別在第4、6、8周時(shí)（腹腔注射戊巴比妥鈉）麻醉3組存活的（12只）模型裸鼠，自心臟取血約1mL后（模型裸鼠）剝離瘤體，進(jìn)行腫瘤大小測(cè)量，采用免疫放射法對(duì)第4周，6周，8周外周血漿內(nèi)GDF-15含量進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)提取不同時(shí)間組腫瘤組織內(nèi)總蛋白采用免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)4周，6周，8周生長的腫瘤組織內(nèi)GDF-15蛋白表達(dá)情況。以外周血GDF-15含量、卵巢腫瘤重量以及造模時(shí)間做相關(guān)性分析，確

3、定血清GDF-15含量卵巢腫瘤生長時(shí)間和重量的相關(guān)性。
　　結(jié)果:模型組腫瘤生長情況:原位移植成功率為100％，4weeks組、6weeks組、8weeks組腫瘤生長隨時(shí)間延長，重量增加明顯，3組間兩兩間比較腫瘤重量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=151.438，P=0.000;0.000);3個(gè)時(shí)間組血漿GDF-15含量:第4周與第6周間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.207)，而第8周與第4周、第6周比較血漿GDF-15含量明顯增高，差

4、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=22.705，P=0.000;0.000)。免疫組化顯示腫瘤組織間質(zhì)內(nèi)GDF-15免疫陽性反應(yīng)隨腫瘤生長時(shí)間延長而增強(qiáng)，Western blot檢測(cè)結(jié)果也顯示腫瘤組織內(nèi)GDF-15蛋白表達(dá)隨腫瘤生長而表達(dá)增強(qiáng)。相關(guān)性分析顯示血漿GDF-15含量與腫瘤生長時(shí)間和重量增加呈明顯正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.720和0.658(P=0.000)。 結(jié)論:裸鼠卵巢腫瘤原位移植模型造模成功率高，GDF-15血漿含量以及腫瘤