轉(zhuǎn)基因大豆內(nèi)、外源基因在食品加工過程中變化規(guī)律的研究.pdf

1、為揭示轉(zhuǎn)基因大豆食品從原料到成品的加工過程中內(nèi)、外源基因的降解變化規(guī)律，為我國的轉(zhuǎn)基因標(biāo)識(shí)條例的實(shí)施及轉(zhuǎn)基因食品安全性的評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)，本論文以轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因大豆為試材，采用定性PCR、多重PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法，分析了豆腐、豆奶、豆粉、醬油等四種大豆加工食品中磨漿、點(diǎn)漿、調(diào)配、均質(zhì)、噴霧干燥、發(fā)酵、殺菌等關(guān)鍵加工工藝對(duì)基因組DNA、調(diào)控元件、目的基因的片段大小及含量的影響。結(jié)果如下：　　1.建立了大豆加工食品中轉(zhuǎn)基因成

2、分的定性PCR技術(shù)、多重PCR方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法，這三種方法分別能有效、準(zhǔn)確地檢測出大豆加工食品中轉(zhuǎn)基因成分及其含量?！　?.通過內(nèi)源、篩選及目的基因片斷大小的變化，研究了不同加工工藝中基因組DNA、調(diào)控元件及外源基因的降解變化規(guī)律。　　針對(duì)CaMV35S啟動(dòng)子，引物35S1/35S1'、35S2/35S2'和35S4/35S4'的擴(kuò)增片段基本不受加工工藝的影響，但35S3/35S3,的擴(kuò)增片段受加工工藝的影響較大。對(duì)

3、于終止子nos基因，所設(shè)計(jì)的兩種引物的擴(kuò)增產(chǎn)物在各個(gè)工藝過程中均能檢測到，nos基因降解程度變化很小?！　?.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，研究了大豆加工食品中不同加工工藝對(duì)加工食品中轉(zhuǎn)基因含量的變化規(guī)律?！　∧{、煮漿過程對(duì)外源基因破壞得很嚴(yán)重，轉(zhuǎn)基因含量迅速下降至0.435％；點(diǎn)漿是一個(gè)生物化學(xué)變化，對(duì)基因組DNA的破壞較為嚴(yán)重，隨著內(nèi)源基因片斷的降解，轉(zhuǎn)基因含量有所回升；外源基因在受到擠壓成型過程后，比內(nèi)源基因更易受到破壞，終產(chǎn)