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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:檢測(cè)腫瘤細(xì)胞株中藥物代謝酶基因MTHFR和DPYD的單核苷酸多態(tài)性。
方法:分別培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株,收集細(xì)胞,采用QIAamp DNA Blood Mini kit試劑盒法提取其基因組DNA,PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)目的片段;采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)MTHFR基因rs1801131、rs1801133和rs2274976及DPYD基因rs1801159、rs1801160和rs17376848的單核苷酸多態(tài)
2、性。
結(jié)果:在本實(shí)驗(yàn)所測(cè)白血病和消化道腫瘤細(xì)胞株中,MTHFR基因rs1801131在AGS、PANC-1、CFPAC-1、HT-29、K562、K562/A02細(xì)胞株中基因型為AC雜合子,在BGC823、SGC7901、MKN28、MCG、SMMC7721、HepG2、SW1990、Lovo細(xì)胞株基因型均為AA純合子。MTHFR基因rs1801133在AGS、PANC-1、CFPAC-1、K562、K562/A02細(xì)胞株
3、中基因型為CC純合子,在SMMC-7721、SW1990、Lovo細(xì)胞株中基因型為TT純合子,在BGC823、SGC7901、MKN28、MCG、HepG2、HT-29細(xì)胞株均為CT雜合子。MTHFR基因rs2274976在Lovo細(xì)胞株中基因型為GA雜合子,其余細(xì)胞株基因型均為GG純合子。DPYD基因rs1S01159在K562、K562/A02細(xì)胞株中基因型均為GG純合子,在AGS細(xì)胞株中基因型為GA雜合子,其余細(xì)胞株基因型均為AA
4、純合子。DPYD基因rs1801160在所測(cè)細(xì)胞株中基因型均為GG純合子。DPYD基因rs17376848在CFPAC-1細(xì)胞株中基因型為AG雜合子,其余細(xì)胞株基因型均為AA純合子。
結(jié)論: MTHFR基因rs1801131、rs1801133、rs2274976和DPYD基因rs1801159、rs1801160、rs17376848在白血病K562和K562/A02兩種細(xì)胞中基因型無差別。在MTHFR rs180113
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