磁性納米Fe3O4載柔紅霉素及5-溴漢防己甲素對(duì)白血病荷瘤裸鼠熱療逆轉(zhuǎn)耐藥研究.pdf

1、目的：本項(xiàng)研究聚焦于Pluranic-127修飾的新型磁性納米Fe3O4顆粒(Fe3O4-Magnetic nanoparticles，F(xiàn)e3O4-MNP)包載化療藥物柔紅霉素(Daunorubicin，DNR)和化療藥物耐藥逆轉(zhuǎn)劑5溴-漢防己甲素(5-Bromotetrandrine，5-BrTet)在荷瘤裸鼠熱療體內(nèi)逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥(MDR)的療效的研究。
　　方法：實(shí)驗(yàn)方法分為兩部分：一、藥物合成，即Fe3O4-MNP及F

2、e3O4-MNP載柔紅霉素及5溴-漢防己甲素(Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet)的合成；二、在體實(shí)驗(yàn)，包括首先構(gòu)建荷瘤裸鼠模型、熱療及療效觀察。在體實(shí)驗(yàn)具體為1.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞大量培養(yǎng)構(gòu)建荷瘤裸鼠模型；2.荷瘤裸鼠隨機(jī)分為5組于外加交變磁場(chǎng)中治療30分鐘(Minute，min)：生理鹽水對(duì)照組0.2 ml/只(A組)；DNR1mg/kg(B組)；5-Br-Tet1mg/kg聯(lián)合DNR1 mg/kg(C組)；Fe3O4-MNP2

3、2mg/kg(D組)；Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet24 mg/kg(E組)；3.治療后12天內(nèi)觀察裸鼠有無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生，觀察腫瘤體積變化，12天后計(jì)算抑瘤率、取各組腫瘤行病理組織蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin，HE)染色分析，取Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet組裸鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟行普魯士藍(lán)染色考察藥物體內(nèi)分布狀況，行蛋白印跡法(Western blot)檢測(cè)各組腫瘤組織P-糖蛋

4、白(P-gp)、bcl-2、bax及caspase-3蛋白的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：制備的Fe3O4-MNP主要呈規(guī)則球形，直徑13.5～23.5 nm，水溶液分散性良好；在熱療期間對(duì)腫瘤局部的升溫作用有著決定性作用；熱療后Fe3O4-MNP及Fe3O4-MNP-DNR-5-BrTet組裸鼠腫瘤體積在12天內(nèi)不斷減小，而其它各組腫瘤體積呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)，抑瘤率提示D組和E組對(duì)于裸鼠皮下K652/A02移植瘤有明顯的抑制作用，明顯優(yōu)于其它

5、各組(P<0.05)；HE染色示D組和E組腫瘤組織可見(jiàn)明顯凋亡現(xiàn)象；Western blot提示E組明顯下調(diào)P-gp及bcl-2的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)bax及caspase-3蛋白的表達(dá)，療效明顯均優(yōu)于其它各組(P<0.05)。
　　結(jié)論：本課題組合成的磁性納米藥物是一種水溶性良好、載藥效率較高、超順磁性、粒徑大小適中且分布均勻安全的新型藥物，非常適用于動(dòng)物體內(nèi)治療；動(dòng)物在體實(shí)驗(yàn)示Fe3O4-MNP-DNR-5-Br-Tet行熱療有較強(qiáng)