煙草煙霧吸入對(duì)大鼠腦組織E-selectin和TNF-α的影響.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文煙草煙霧吸入對(duì)大鼠腦組織Ein和TNFα的影響姓名：劉淑杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：柳忠蘭2002.4.1／材料和方法＼＼1實(shí)驗(yàn)材料：健康wistar大鼠60只，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)用煙為市售某牌香煙，自制8060x58em3的煙箱，E—selectin、TNF—a單克隆抗體及SABC試劑盒均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。2實(shí)驗(yàn)方法：健康w／star大鼠60只，隨機(jī)分成六組：A組

2、：正常對(duì)照組；B組：非吸煙對(duì)照組；C組：短期吸煙組；D組：長(zhǎng)期小量吸煙組；E組：長(zhǎng)期大量吸煙組；F組：戒煙組。長(zhǎng)期大量組、短期吸煙組、戒煙組每次吸煙lO支，長(zhǎng)期小量吸煙組每次吸煙4支，每組每天吸煙兩次，每次30分鐘，兩次間隔4小時(shí)。長(zhǎng)期組吸煙三個(gè)月，短期組吸煙一個(gè)月，戒煙組吸煙一個(gè)月，戒煙一個(gè)月。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在各時(shí)間點(diǎn)，經(jīng)10％水合氯醛麻醉，以150毫升肝素化生理鹽水和4％多聚甲醛250ml進(jìn)行灌流固定，將固定后的標(biāo)本，常規(guī)進(jìn)行水洗，材

3、料脫水、浸蠟、包埋，在石蠟切片機(jī)上切取冠狀腦片，連續(xù)切片lO張，厚度約5pm，分別行HE染色，E—selectin及TNF—d免疫組化染色。免疫組化染色采用SABC法，DAB顯色，光學(xué)顯傲鏡下觀察各組免疫組化切片陽(yáng)性反應(yīng)物沉積情況，在切片由皮質(zhì)處觀測(cè)5個(gè)不重復(fù)高倍視野，分別計(jì)數(shù)E—selectin各組陽(yáng)性血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)及TNF一儀陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)4標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，應(yīng)用q檢驗(yàn)，做組間兩兩分析比較，P0