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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景:
斑禿(Alopecia areata,AA)為一種慢性炎癥性疾病,主要表現(xiàn)為突然發(fā)生的非疤痕性圓形或橢圓形斑片狀脫發(fā),多無(wú)自覺(jué)癥狀,大小不一,界限清楚。目前認(rèn)為復(fù)發(fā)性的斑禿是一種由CD4+或CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的組織特異性自身免疫性疾病,并認(rèn)為CD4+或CD8+T細(xì)胞主要攻擊有免疫豁免的生長(zhǎng)期毛囊,從而導(dǎo)致了斑禿的產(chǎn)生。IL2RA,也就是CD25,在CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)膜表面高表達(dá),在維持免疫平
2、衡方面起到了重要作用,并且可以抑制自身免疫反應(yīng)的發(fā)生。目前已經(jīng)有全基因組分析研究發(fā)現(xiàn)IL2RA基因(位于染色體10p15.1)與斑禿的關(guān)聯(lián),從而認(rèn)為IL2RA基因的單核苷酸多態(tài)性與斑禿的致病因素存在一定的關(guān)聯(lián)。
目的:
探討斑禿患者IL2RA基因中rs3118470單核苷酸多態(tài)性的特點(diǎn)及其在斑禿發(fā)病中的關(guān)聯(lián),以及其在斑禿不同發(fā)病階段及輕重程度之間的關(guān)系,有助于斑禿發(fā)病機(jī)制的探討以及開(kāi)辟斑禿新的治療手段。
方
3、法:
根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn),分別選取斑禿患者427例(病例組)和年齡、性別匹配的健康對(duì)照者430例(對(duì)照組),填寫(xiě)相關(guān)問(wèn)卷收集基本資料及抽取外周血,提取DNA。應(yīng)用高分辨率溶解曲線分析法(high-resolution meltinganalysis,HRM)分析IL2RA基因中rs3118470位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性(single-nucleotide polymorphism,SNP),以C/C,T/C和T/T基因型表現(xiàn)出
4、的不同溶解曲線來(lái)區(qū)分,并采用直接測(cè)序法印證高分辨率溶解曲線分析法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與測(cè)序結(jié)果的一致性。
結(jié)果:
427例斑禿病例組中,C/C,T/C和T/T基因型分別占16.2%,48.2%和35.6%。采用直接測(cè)序法發(fā)現(xiàn)高分辨率溶解曲線分析法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與測(cè)序結(jié)果的一致。與對(duì)照組比較,病例組的基因型及等位基因的分布特點(diǎn)與正常對(duì)照組之間存在顯著差異,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.0001)。此外,與正常對(duì)照組相比,斑禿病例組中等
5、位基因C型的表達(dá)率比較高(p<0.0001)。
斑禿病例中有家族史的病例中發(fā)現(xiàn)等位基因C型的頻率較高(p=0.034),以及C/C基因型的出現(xiàn)頻率比其余無(wú)家族史的斑禿病例相比較高(p<0.0001)。輕型斑禿與重型斑禿比較,基因型與等位基因的分布頻率有顯著差異(p=0.042;p=0.049)。此外,基因型與等位基因的分布頻率與性別(p=0.336; p=0.557)及發(fā)病年齡(p=0.854; p=0.937)的關(guān)聯(lián)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)
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