非創(chuàng)傷性股骨頭壞死骨髓干細胞治療及髖關(guān)節(jié)置換術(shù)療效研究.pdf

1、第一部分、脂肪來源干細胞的分離、培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化為成骨細胞的研究
　　目的:非創(chuàng)傷性股骨頭壞死早期（Ⅰ、Ⅱ期）可通過骨髓干細胞移植來獲得臨床和形態(tài)學改善，骨髓干細胞具有多向分化潛能，能夠在體內(nèi)微循環(huán)環(huán)境影響、應(yīng)力作用及血液供應(yīng)條件誘導(dǎo)下，向成骨細胞分化，進而促進股骨頭成骨、再血管化，進而達到修復(fù)壞死股骨頭的目的。但在臨床工作中，自體骨髓干細胞的采集較為困難，同時存在采集量少及分離提取步驟繁瑣等缺點，故臨床上很難獲得足夠的骨髓干細胞數(shù)

2、量，從而導(dǎo)致成骨細胞(Osteoblast，OB)來源不足。
　　作為骨修復(fù)工程的重大難題，成骨細胞來源較少、細胞分化又相對復(fù)雜等問題一直制約著骨修復(fù)的進步和發(fā)展，因此積極探索成骨細胞的其他來源對治療骨折，甚至治療早期股骨頭壞死均具有重要的意義。
　　脂肪來源干細胞(adipose-derived stem cells，ADSCs)具有一般干細胞的特點:它屬于多分化潛能細胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞，因此對脂肪

3、干細胞進行定向誘導(dǎo)可分化為成骨細胞。此外，與其他細胞相比有以下優(yōu)勢:取材容易，體外增殖速度快，ADSCs能夠進行自體移植，無免疫排斥反應(yīng)等。脂肪來源干細胞所具有的修復(fù)、替代和再生能力為臨床醫(yī)學尤其是骨外科提供了一個發(fā)展新療法的機會，它可以轉(zhuǎn)化成損傷的成骨細胞、組織和器官，進而起到組織修復(fù)與再生作用。
　　方法:利用實驗法，取成年大鼠脂肪分離獲得ADSCs經(jīng)細胞免疫熒光法、RT-PCR法鑒定ADSCs獲得純化后的細胞，利用化學試劑法

4、將ADSCs誘導(dǎo)分化為成骨細胞。
　　結(jié)果:經(jīng)茜素紅S化學染色法進行染色、RT-PCR檢測成骨細胞特異性基因的表達與否、及其誘導(dǎo)前后的堿性磷酸酶含量的變化情況，鑒定誘導(dǎo)后的成骨細胞，結(jié)果顯示我們成功的將ADSCs誘導(dǎo)為成骨細胞。
　　結(jié)論:分離的ADSCs經(jīng)細胞免疫熒光法、RT-PCR法等方法鑒定，其表面標志鑒定結(jié)果與以往研究結(jié)果相一致，CD13，CD29，CD44，CD71，CD90，CD105陽性表達，而CD34，vWF

5、陰性表達，并通過化學誘導(dǎo)劑法將脂肪干細胞成功的誘導(dǎo)為成骨細胞，可以用于后續(xù)動物模型試驗中股骨頭壞死的修復(fù)與治療，并在不遠的將來逐步應(yīng)用到股骨頭壞死的臨床治療中。
　　第二部分、髓芯減壓聯(lián)合自體骨髓干細胞移植、多孔鉭棒植入術(shù)微創(chuàng)治療早期股骨頭壞死的療效分析
　　目的:股骨頭壞死(osteonecrosis of the femoral head，ONFH)是股骨頭血供障礙導(dǎo)致骨細胞缺血性壞死的一種漸進性疾病，多見于中青年，是臨

6、床骨科的常見病。許多患者因未及時、有效治療而最終不得不接受人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。傳統(tǒng)的單純髓芯減壓治療早期股骨頭壞死的療效受大多學者肯定，但由于術(shù)后股骨頭軟骨下骨板缺乏有效結(jié)構(gòu)支撐，易造成塌陷、骨折等并發(fā)癥，因此仍存有爭議。近年來，隨著對ONFH發(fā)病機制的深入研究，多孔金屬鉭棒治療早期ONFH成為了研究熱點，其與人體有高度的生物相容性，能促進壞死區(qū)再血管化，且與骨骼彈性模量相當，可起到良好的支撐作用;同時，利用自體骨髓干細胞的多向分化潛能促

7、進股骨頭內(nèi)成骨、再血管化，進而修復(fù)壞死股骨頭的干細胞技術(shù)也成為了熱門課題。這些技術(shù)在臨床上均已取得一定療效，為ONFH的進一步治療提供了廣闊的發(fā)展前景。如果將3種技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用治療早期ONFH效果會如何呢？目前鮮有文獻報道。
　　為此，我們采用髓芯減壓聯(lián)合自體骨髓干細胞移植、多孔鉭棒植入術(shù)微創(chuàng)治療早期ONFH并隨訪觀察其臨床療效。
　　方法:據(jù)國際骨循環(huán)學會(ARCO)分期標準，選取2011年1月～2012年6月共30例(36

8、髖)早期（Ⅰ、Ⅱ期）ONFH患者在我院行髓芯減壓聯(lián)合自體骨髓干細胞移植、多孔鉭棒植入術(shù)微創(chuàng)治療。其中男21例，女9例，年齡36～60歲，平均41.57歲;病程為15～32個月，平均22.53個月。每位患者均采用統(tǒng)一的術(shù)式:經(jīng)自體骨髓干細胞采集、分離、髓芯減壓后，植入骨髓干細胞和多孔鉭棒。術(shù)前及術(shù)后隨訪過程中根據(jù)Harris評分和改良賓夕法尼亞州立大學骨壞死放射學分期系統(tǒng)進行評估。
　　結(jié)果:隨訪15-32個月，隨訪時行Harris

9、評分和影像學檢查。(1)臨床療效評價:采用髖關(guān)節(jié)Harris評分，由術(shù)前的(54.30+9.42)分，提高到術(shù)后6個月的(67.26±6.35)分，和末次隨訪時的(83.26±8.15)分，優(yōu)良率為88.89％，與術(shù)前比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。末次隨訪時，所有患者髖關(guān)節(jié)疼痛癥狀均減輕或消失，髖關(guān)節(jié)活動度明顯增大，功能改善。Harris評分指標中，以疼痛指數(shù)改變最為顯著。(2)影像學療效評價:末次隨訪時本組病例組無一例發(fā)展為

10、ARCOⅢ期塌陷，但有4例進展為ARCOⅡ期。根據(jù)改良賓夕法尼亞州立大學骨壞死放射學分期系統(tǒng)，6期共15種亞期按總分15分評定，由術(shù)前的（10.18±1.79）分升高至末次隨訪時的（12.56±1.31）分，平均提高2.41分，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:髓芯減壓聯(lián)合自體骨髓干細胞移植、多孔鉭棒植入術(shù)微創(chuàng)治療早期ONFH是一種創(chuàng)傷小、安全、有效的方法，可使早期ONFH患者獲得滿意的臨床療效，但尚需大樣本臨床試驗及

11、長期隨訪進一步驗證。
　　第三部分、生物型全髖關(guān)節(jié)置換治療青壯年晚期股骨頭壞死的近期療效分析
　　目的:股骨頭壞死(osteonecrosisofthe femoral head，ONFH)是股骨頭血供障礙導(dǎo)致骨細胞缺血性壞死的一種漸進性疾病，常見于青壯年。股骨頭壞死進展快，保守治療效果往往不佳。據(jù)統(tǒng)計約60％-80％未經(jīng)有效治療的患者將在1-5年內(nèi)出現(xiàn)股骨頭塌陷甚至變形，其中多數(shù)又將在2-3年內(nèi)進展至股骨頭壞死晚期而需行人

12、工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。目前人工全髖關(guān)節(jié)置換作為一種成熟而經(jīng)典的治療手段已獲得眾多患者和臨床骨科醫(yī)師的普遍認可。由于青壯年晚期ONFH患者髖關(guān)節(jié)活動強度與頻率較大，將來可能會面臨人工關(guān)節(jié)翻修問題，而文獻報道傳統(tǒng)的骨水泥型全髖關(guān)節(jié)假體置換術(shù)后翻修率較高、翻修難度大，因此，如何延長假體使用壽命，同時保留更多骨質(zhì)方便將來翻修是施行初始全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)的骨科醫(yī)師所必須慎重考慮的重要因素。
　　為此，我們對青壯年晚期ONFH患者采用近年來臨床應(yīng)用廣泛

13、、保留骨質(zhì)較多的非骨水泥生物型Ribbed假體進行全髖關(guān)節(jié)置換，并隨訪觀察其術(shù)后近期臨床療效。
　　方法:對2010年6月～2011年10月在我院接受采用生物型Riberd假體行初次全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)治療的27例32髖青壯年晚期股骨頭壞死患者資料進行回顧性研究分析。所有患者根據(jù)國際骨循環(huán)學會(ARCO)分期均為Ⅲ期以上，其中男17例，女10例;年齡27-58歲，平均41.7歲;均采用后外側(cè)入路。采用Harris髖關(guān)節(jié)評分和WOMAC骨

14、關(guān)節(jié)炎指數(shù)評估患者術(shù)前及術(shù)后隨訪時的髖關(guān)節(jié)功能。術(shù)后隨訪時拍攝雙髖X線片了解假體的位置以及有無松動、周圍有無骨質(zhì)吸收情況。
　　結(jié)果:失訪1例，26例30髖獲得隨訪，隨訪時間23～39個月，平均28.5個月。術(shù)后4例患者出現(xiàn)雙下肢不等長，但長度差值＜2cm。所有患者術(shù)后隨訪期間未發(fā)生感染、股骨頸骨折、下肢深靜脈血栓、肺栓塞等嚴重并發(fā)癥。術(shù)后所有患者髖關(guān)節(jié)疼痛癥狀均明顯改善或消失，無一例出現(xiàn)髖關(guān)節(jié)翻修，末次隨訪X線片上假體位置良好，